一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108802215A(43)申请公布日2018.11.13(21)申请号201810432934.0(22)申请日2018.05.08(71)申请人辽宁通正检测有限公司地址110000辽宁省沈阳市铁西区北一西路52甲3号(72)发明人考志强王雪莹陈英续张进柏中波王应男张国莹(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/14(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图4页(54)发明名称一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法(57)摘要本发明提供了一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法，用乙腈均质提取样品中残留的氯虫苯甲酰胺，加入无水硫酸镁去水，氯化钠盐析，经涡旋、振荡、离心后取上清液，加入乙腈后用水定容，混匀后过0.22μm滤膜，采用配有电喷雾离子源的高效液相色谱-串联质谱仪检测，分段多事件监测，外标法定量，标准系列工作曲线采用不含待测组分的空白基质液配制。本方法添加回收率在97.6%~117.9%之间，平均相对标准偏差（RSD）在1.5%~6.0%之间，当添加检出限为0.001mg/kg时，仪器信噪比均大于3。经过验证，本方法操作简单快速可靠，定性定量准确，灵敏度高，重复性好，且易于实现大批量的样品分析。我国对蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的最低限量值为0.01mg/kg，本方法满足其要求。CN108802215ACN108802215A权利要求书1/2页1.根据权利要求1所述的一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法，其特征在于包括以下步骤：提取将蔬菜样品切碎混匀均一化制成匀浆，称取15g精确至0.01g制备好的样品于具塞离心管中，准确加入15mL乙腈后在匀浆器上高速匀浆提取2分钟，加入6.0g无水硫酸镁去水，1.5g氯化钠盐析，经涡旋、振荡后，以6000r/min离心5min，取1.0mL上清液到10mL容量瓶，加入4mL乙腈后用水定容至刻度，混匀后过0.22μm有机滤膜，采用配有电喷雾离子源的高效液相色谱-串联质谱仪检测；标准系列工作溶液的配制购买市售有证的甲醇中氯虫苯甲酰胺标准溶液ρ=100μg/mL，冷藏避光保存；准确吸取1mL浓度为100μg/mL氯虫苯甲酰胺标准溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为10μg/mL的标准储备溶液，冷藏避光保存；准确吸取1mL浓度为10μg/mL氯虫苯甲酰胺标准储备溶液于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1μg/mL的标准中间溶液，冷藏避光保存；选取不含待测组分的同种类基质空白样品，切碎混匀均一化制成匀浆，称取15g精确至0.01g于具塞离心管中，准确加入15mL乙腈后在匀浆器上高速匀浆提取2分钟，加入6.0g无水硫酸镁去水，1.5g氯化钠盐析，经涡旋、振荡后，以6000r/min离心5min，取1.0mL上清液到10mL容量瓶，加入4mL乙腈后用水定容至刻度，混匀后过0.22μm有机滤膜，制成空白基质液，用于标准曲线的配制，以减少基质效应；准确吸取一定量的标准中间溶液，分别用空白基质溶液稀释并定容成标准工作溶液，现用现配；溶液配制0.1%甲酸溶液：准确量取500mL水，加入500μL甲酸，混匀，待用；仪器测定条件高效液相色谱条件：色谱柱：C18柱1.7μm×2.1mm×100mm；流动相：乙腈＋0.1%甲酸溶液梯度洗脱；柱温：40℃；进样体积：10μL；质谱条件：离子源：ESI源；离子化模式：电喷雾电离正离子模式；扫描方式：多反应监测；毛细管电压：0.5kV；雾化气、反吹气为高纯氮气，碰撞气均为高纯氩气；使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求；监测离子对：483.82＞452.88、483.82＞285.96、483.82＞177.05；测定和结果计算在相同的实验条件下进行样品测定时，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且选择的离子均出现，所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比一致，则可定性；将标准工作溶液注入仪器绘制标准曲线，得到样品中氯虫苯甲酰胺的浓度，代入下列公式得出样品中氯虫苯甲酰胺的含量：X=式中：X―样品中氯虫苯甲酰胺含量，mg/kg；ρ―样品制备液中氯虫苯甲酰胺的浓度，ng/mL；v―最终定容体积，mL；f―稀释倍数；m―样品的取样量，g。2CN108802215A权利要求书2/2页2.根据权利要求1所述的一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法，其特征在于，检出限为0.001mg/kg。3.根据权利要求1所述的一种蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定方法，其特征在于，所述标准工作溶液由经过前处理的空白基质液配制，配制曲线的梯度质量浓度为：1ng/mL