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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109265373A(43)申请公布日2019.01.25(21)申请号201811303798.1(22)申请日2018.11.03(71)申请人郑州安图生物工程股份有限公司地址450016河南省郑州市经济技术开发区经开第十五大街199号(72)发明人杨书彬朱飞飞马建军刘志磊杨红云付光宇王则宇吴学炜(74)专利代理机构郑州异开专利事务所(普通合伙)41114代理人王霞(51)Int.Cl.C07C277/08(2006.01)C07C279/14(2006.01)C07D311/16(2006.01)G01N21/78(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图4页(54)发明名称一种氨基酸类底物及其制备方法和用途(57)摘要本发明公开了一种氨基酸类底物,其结构通式如图1所示。本发明通过对该氨基酸类底物中二肽的合成工艺及二肽与色原连接工艺的开发创新、提取纯化工艺的创新及应用验证,使得产品各步反应收率有了较大提高,色泽接近白色,减小了底物颜色在鉴定过程中的影响,并较大程度提高了需氧菌群阴道炎检测过程中的灵敏度及检测准确度。本发明制备的底物为盐酸盐形式,以盐酸盐形式进行检测应用时可较大程度提高底物的溶解性;在检测应用中按照需氧菌群阴道炎检测的配制要求进行相应配制工作,并依据检验标准对合成底物显色性能与市场已有的需氧菌群阴道炎检测的显色性能进行对比检验,显色性能优于市场上需氧菌群阴道炎检测试剂的显色性能。CN109265373ACN109265373A权利要求书1/2页1.一种氨基酸类底物,其特征在于:所述底物的结构式为。2.根据权利要求1所述的氨基酸类底物,其特征在于:所述底物的衍生物为,,,,。3.权利要求1所述氨基酸类底物的制备方法,其特征在于:包括下述步骤:第一步,将甘氨酸化合物在一定浓度的氢氧化钠水溶液中与适当量的二碳酸二叔丁酯反应,反应完成后经酸洗淬灭后收集有机相进行干燥并减压浓缩,除去溶剂得到白色固体产物备用;第二步,将第一步得到的白色固体于二氯甲烷溶液中在催化剂4-二甲氨基吡啶作用与N-羟基丁二酰亚胺反应,反应完成后对反应母液进行过滤,滤液部分进行酸洗,酸洗后对有机相进行干燥,干燥后对有机相进行减压浓缩,除去溶剂,剩余残留物溶于少量乙酸乙酯中并于-20℃条件下进行重结晶,过滤后得到浅黄色固体产物备用;第三步,将第二步得到的浅黄色固体与L-精氨酸在四氢呋喃中搅拌反应,反应完成后用乙酸乙酯/纯化水对母液进行萃取,收集水相并对水相物质进行柱层析纯化,收集水下物质并减压浓缩,得到雪白色发泡状固体化合物备用;第四步,将第三步得到的化合物在少量无水甲醇中分散均匀后,滴加相同摩尔量的浓盐酸,室温条件下搅拌0.5h,除去溶剂得到米白色发泡状固体化合物备用;2CN109265373A权利要求书2/2页第五步,以第四步得到的化合物与β-萘胺为原料,室温下在二氯甲烷溶液中经缩合试剂催化反应,反应完成后经浓缩、柱层析纯化得到浅黄色发泡状固体化合物备用;第六步,将第五步得到的化合物在无水甲醇中经氯化氢催化,脱除BOC保护基,待反应完成后用饱和食盐水、乙酸乙酯萃取,收集水相,经柱层析纯化、冻干处理,得到类白色粉末状氨基酸类底物纯品。4.权利要求1所述氨基酸类底物在需氧菌群阴道炎检测中的应用。3CN109265373A说明书1/5页一种氨基酸类底物及其制备方法和用途技术领域[0001]本发明涉及体外检测用试剂,尤其是涉及一种可稳定显色的氨基酸类底物,本发明还涉及该底物的制备方法和用途。背景技术[0002]需氧菌群阴道炎(AV)是临床新确定的一种阴道炎,与细菌性阴道炎(BV)、滴虫性阴道炎(TV)的病原体不同,治疗方案和结局也不相同。AV患者的临床症状、体征和TV患者极为相似,若不明确诊断,易造成误诊。所以准确区别这两种阴道炎,对阴道感染患者的诊疗具有重要意义。[0003]目前常用的检测需氧菌阴道炎的方法是:①细菌鉴定仪法,该法准确度较高,但存在费用昂贵,无法直接上标本及纯菌培养时间长等缺点;②普通培养加生化鉴定法即金标准法:该法特异性较好,但需进行细菌纯培养,鉴定试验繁琐;③分子生物学法即PCR法:该法快速敏感,但假阳性难以排出,对人员和设备要求均较高。[0004]由于上述检测技术或成本高、或操作繁琐、或设备要求高、或培养时间较长、或灵敏度较低,因此兼具灵敏度高、特异性好、操作简便、培养时间短等优点的检测方法的开发研究具有重要的市场应用价值。基于此,研究出具有高灵敏度、不需借助紫外照射观察即可稳定显色的底物合成方法及其应用具有重要的现实意义。发明内容[0005]本发明的目的在于提供一种可稳定显色的氨基酸类底物,本发明还公开了该底物的制备方法和在需氧菌群阴道炎检测中的