一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109907326A(43)申请公布日2019.06.21(21)申请号201910248654.9C12P21/06(2006.01)(22)申请日2019.03.29C07K1/34(2006.01)(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人关爽刘宇杭卢静(74)专利代理机构长春市恒誉专利代理事务所(普通合伙)22212代理人李荣武(51)Int.Cl.A23L33/165(2016.01)A23L33/18(2016.01)A23L13/40(2016.01)A61K38/01(2006.01)A61P3/14(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法(57)摘要本发明涉及一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法，利用大量的林蛙骨肉，进行林蛙骨肉螯合钙的研究，不仅妥善处理了骨的问题，避免了资源的浪费，还减轻了环境的压力，提高经济效益和生态效益。包括粗制林蛙骨肉粉、林蛙骨肉粉酶解、酶解液的超滤以及酶解液与氯化钙的鳌合。有益效果为采用胰蛋白酶酶解的方法制备多肽，采用纳滤的方法制备得到小分子量多肽，从而得到分子量小的胶原多肽液。用该方法与钙离子鳌合后得到的多肽鳌合钙,在人体内的吸收率高,补钙效果好并且操作简单，不需要冻干多肽粉即可以螯合，效率高、易控性强、获得的胶原多肽鳌合钙螯合率较高。本发明制备的林蛙骨肉多肽螯合钙可用于开发普通食品、保健品或用于医药领域。CN109907326ACN109907326A权利要求书1/1页1.一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：林蛙骨肉粉的制备将林蛙骨肉洗净，45-65℃烘干，时间2-4h，置于粉碎机中粉碎至40-60目，得到较细的林蛙骨肉粉。步骤二：酶解粉碎后，加入胰蛋白酶进行酶解，料液比(质量体积比g/ml)为1:5-1：20；加酶量为11000-40000U/mg，酶解时间为3h-5h，酶解温度为40-60℃，ph为6.5-8.5；酶解完成后90-100℃灭酶20min；高速离心机10000r/min离心30min，取上清液，即获得林蛙骨肉酶解胶原多肽液。步骤三:超滤冷冻干燥将步骤二中所得滤液用超滤机通过3000Da超滤膜进行超滤浓缩，得浅黄色澄清林蛙骨肉胶原多肽液，得到分子量小于3000Da的林蛙骨肉多肽液。步骤四：螯合使用的小分子量的林蛙骨肉酶解多肽液和无水Cacl2进行鳌合反应,多肽液与Cacl2的质量比为10：2-10：0.5ml/g，鳌合温度为20-40℃,鳌合时间为30-50min，鳌合反应结束后,向溶液中加入8-10倍体积的无水乙醇沉淀鳌合物,沉淀体系于4℃条件下沉降1-3h，4000-5000r/min离心10-20min,取沉淀,真空冷冻干燥后即得林蛙骨肉胶原多肽鳌合钙。2.根据权利要求1所述的一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法,其特征在于，所述步骤一中烘干温度60℃，时间2.5h，粉碎数目为60目。3.根据权利要求1所述的一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法,其特征在于，所述步骤二中料液比为1:10g/ml，酶解过程中的加酶量为38000U/mg，酶解时间为4h，酶解温度为45℃，酶解时的ph为8.2。4.根据权利要求1所述的一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法,其特征在于所述步骤三中将酶解后得到的酶解液通过3000Da的超滤膜，收集小于3000Da组分的滤液。5.根据权利要求1所述的一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法,其特征在于所述步骤四中多肽液与Cacl2的质量比为10:1ml/g，螯合温度为40℃，螯合时间为40min，无水乙醇的添加倍数为9，于4℃条件下沉降2h，转速设置为4000r/min，离心15min。6.根据权利要求1所述制备的林蛙骨肉多肽螯合钙在普通食品中的应用。7.根据权利要求1所述制备的林蛙骨肉多肽螯合钙在保健品中的应用。8.根据权利要求1所述制备的林蛙骨肉多肽螯合钙在医药领域中的应用。2CN109907326A说明书1/4页一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法技术领域[0001]本发明属于生物技术领域,涉及一种胶原多肽鳌合钙的制备方法,具体涉及一种基于林蛙骨肉胶原多肽螯合钙的制备方法。背景技术[0002]东北林蛙是生长在黑龙江、吉林和辽宁三省的纯野生动物，它集美容、药用、食用为一体，是我国著名的经济蛙种。据不完全统计，东北地区年产林蛙量约为10亿余只左右，林蛙的绝大部分用途是提取林蛙油，但林蛙油仅占整蛙的15％左右，而且只能从雌蛙当中提取，其它部位如脑、皮、肉和骨等基本作为饲料或废弃物处理，造成了严重的资源浪费