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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109956859A(43)申请公布日2019.07.02(21)申请号201711400058.5(22)申请日2017.12.22(71)申请人广州中国科学院先进技术研究所地址511458广东省广州市南沙区海滨路1121号(72)发明人刘陈立刘复荣蒙海林何敬愉崔金明刘明珠(74)专利代理机构广州容大专利代理事务所(普通合伙)44326代理人刘新年(51)Int.Cl.C07C51/42(2006.01)C07C59/08(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图1页(54)发明名称一种从乳酸发酵液中分离提纯乳酸的方法(57)摘要本发明涉及微生物分离提纯领域,具体涉及一种从乳酸发酵液中分离提纯乳酸的方法,主要包括以下步骤:乳酸发酵液热处理,去除菌体等不溶性杂质;酸处理;浓缩;有机试剂沉淀;离心过滤;浓缩;脱色;硅胶层析柱;ODS柱;浓缩得成品。本发明方法得到乳酸成品,测得其纯度在93%以上,乳酸回收率在67%以上,制备过程中减少了主要成分的流失、节省了材料、减少了废液的排放,同时还缩短了处理时间。CN109956859ACN109956859A权利要求书1/1页1.一种从乳酸发酵液中分离提纯乳酸的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)将乳酸发酵液热处理,去除不溶性杂质;(2)将(1)中处理液进行酸处理;然后浓缩;再加入有机试剂进行沉淀;然后离心过滤;(3)将(2)所得滤液浓缩;(4)将(3)所得浓缩液进行脱色;(5)将(4)所得处理液过硅胶层析柱;(6)将(5)所得处理液过ODS柱;(7)将(6)所得处理液浓缩得成品。2.根据权利要求1所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述从乳酸发酵液中分离提纯乳酸菌的方法,包括以下步骤:(1)将乳酸发酵液加热,恒温搅拌,离心过滤,得滤液1;(2)向滤液1中加入强酸调节pH至1.0,旋蒸浓缩至稠膏状,向浓缩液中添加有机试剂,混匀,静置,离心过滤,得滤液2;(3)将滤液2浓缩,得浓缩液3;(4)用脱色剂对浓缩液3进行脱色,然后过滤得滤液4;(5)将滤液4浓缩至稠膏状,过硅胶层析柱,用洗脱剂洗脱,得洗脱馏分5;(6)将洗脱馏分5中的洗脱剂除去,过ODS柱,冲洗,得馏分6;(7)将馏分6浓缩,得到乳酸成品。3.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述步骤(1)中离心转速为8000~12000g,离心时间为10~30min;所述步骤(2)中离心转速为8000~12000g,离心时间为10~30min。4.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述过滤方式为真空抽滤,滤膜规格为0.45μm。5.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述步骤(1)中加热温度为60℃~90℃,搅拌时间为5~10min。6.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的强酸浓度为40%~98%;有机试剂的终浓度为50%~90%;静置时间为4~10h。7.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,步骤(3)所述的浓缩液3终密度为1.05~1.20g/mL。8.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)中脱色剂与浓缩液3的质量比为0.3:100~1.0:100,脱色温度为75~80℃,脱色时间为30~60min。9.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述步骤(5)中过硅胶层析柱时,所述硅胶柱径高比为1:5~1:25;硅胶柱上样前,将硅胶G与浓缩液按质量比为1:2混匀,然后上柱。10.根据权利要求2所述的分离提纯乳酸的方法,其特征在于,所述步骤(5)中有机试剂为甲醇/二氯甲烷体系,洗脱方式为梯度浓度洗脱。2CN109956859A说明书1/7页一种从乳酸发酵液中分离提纯乳酸的方法技术领域[0001]本发明涉及微生物分离提纯领域,具体涉及一种从乳酸发酵液中分离提纯乳酸的方法。背景技术[0002]广泛用于食品加工和医疗行业的L-乳酸通常通过发酵制造。在过去十年中,由于其实际需求的增加,潜在的生产力越来越受到重视。乳酸(2-羟基丙酸)是一种天然存在的羟基羧酸,首先由瑞典化学家Scheele于1780年由酸奶精制而成。随后,由于其作为酸味剂、增味剂和防腐剂等多种用途,乳酸在食品、医药、化妆品和其他化学工业占据重要地位。此外,L-乳酸可以用作生产聚乳酸(PLA)的原料,而PLA是医疗应用中存在的聚合物和环境友好的生物可降解塑料,它可以代替来源于石油资源的合成塑料,因而乳酸的生产受到了极大的关注,具有广泛的应用前景。[0003]乳酸可以通过化学合成或微生物发酵的生物技术来进行商业化生产。最常见的合成乳酸的方法是通过乳腈的水解方法。然而