一种内酯型槐糖脂的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110156845A(43)申请公布日2019.08.23(21)申请号201910502315.9(22)申请日2019.06.11(71)申请人北京泛球生物科技有限公司地址100096北京市海淀区悦秀路99号6层2单元603A(72)发明人王福聚孙强李小连董华强(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君商秀玲(51)Int.Cl.C07H1/06(2006.01)C07H13/06(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种内酯型槐糖脂的制备方法(57)摘要本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种内酯型槐糖脂的制备方法。本发明提供的内酯型槐糖脂的制备方法包括：将含有内酯型槐糖脂和酸型槐糖脂的生物发酵液经预处理后得到槐糖脂层，将槐糖酯层与水混合后分离去除固体杂质得到槐糖脂溶液，在所述槐糖脂溶液中加入磷酸二氢盐和邻苯二甲酸氢盐，在碱性条件下冷却结晶得到内酯型槐糖脂。该方法避免了高毒性有机溶剂的使用，降低了生产成本并提高了生产过程中的安全性，制备工艺简单，同时保证了较高的内酯型槐糖脂的纯度和收率，适合用于在实践生产中推广应用。CN110156845ACN110156845A权利要求书1/1页1.一种内酯型槐糖脂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将含有内酯型槐糖脂和酸型槐糖脂的生物发酵液经预处理后得到槐糖脂层，将所述槐糖酯层与水混合后分离去除固体杂质得到槐糖脂溶液，在所述槐糖脂溶液中加入磷酸二氢盐和邻苯二甲酸氢盐，在碱性条件下冷却结晶得到内酯型槐糖脂。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性条件为pH8～10；所述冷却结晶为降温至1～10℃进行结晶；优选地，所述碱性条件为pH8～9；所述冷却结晶为降温至4～6℃进行结晶。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述邻苯二甲酸氢盐与所述磷酸二氢盐的添加量的摩尔比为1：(1～2)。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述邻苯二甲酸氢盐的添加量为至浓度为0.2～0.4mol/L；和/或，所述磷酸二氢盐的添加量为至浓度为0.2～0.6mol/L。5.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述邻苯二甲酸氢盐为邻苯二甲酸氢钾；所述磷酸二氢盐为磷酸二氢钾。6.根据权利要求1～5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述结晶的时间为10～20小时。7.根据权利要求1～6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述将所述槐糖酯层与水混合后分离去除固体杂质得到槐糖脂溶液中，水的添加量为槐糖脂层体积的4～8倍；优选地，将所述槐糖酯层与4～8倍体积的水混合后，充分搅拌，离心去除固体杂质。8.根据权利要求1～7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述槐糖脂层中内酯型槐糖脂的含量＞60％。9.根据权利要求1～8所述的制备方法，其特征在于，所述预处理为将发酵液高温处理后自然沉降分层；优选地，所述自然沉降分层为在25～30℃静置3～5小时。10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述高温处理为在100～125℃处理10～30分钟。2CN110156845A说明书1/6页一种内酯型槐糖脂的制备方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种内酯型槐糖脂的制备方法。背景技术[0002]槐糖脂(sophorolipid)是由酵母菌以糖和植物油等为碳源，经一定条件的发酵工艺产生的微生物次级代谢产物。槐糖脂是一种糖脂类生物表面活性剂，其具有常规表面活性剂所具有的增溶、乳化、润湿、发泡、分散、降低表面张力等通用性能，而且还具有无毒、100％可生物降解、耐温、耐高盐、适应pH范围广以及对环境友好等特性。槐糖脂可应用于石油、环保、医药、食品、化妆品、洗涤、家居护理、农业、饲料等领域，可部分或完全替代化学合成表面活性剂的使用。[0003]槐糖脂分为内酯型和酸型两种，通常内酯型槐糖脂具有较高的降低表面张力和抗菌的能力，而酸型槐糖脂具有更好的溶解度和发泡能力。此外，与酸型槐糖脂相比，内酯型槐糖脂具有更好的抗菌抗炎乳化能力且在高温高盐情况下更加稳定。然而，一般地，微生物发酵所产槐糖脂主要由17-羟基十八烯酸或十八烷酸的内酯型和酸型槐糖脂同系物构成，而酸型和内脂型槐糖脂在结构和理化性质上具有高度的相似性，使得两者的分离提纯较为困难。目前，现有技术多采用有机试剂萃取的方法制备内酯型槐糖脂，例如，中国专利CN105886572采用乙酸乙酯萃取并在低温环境析出内酯型槐糖脂的方法制备内酯型槐糖脂。上述制备方法的生产成本高，且在生产中存在着安全风险，这些因素给内酯型槐糖脂及其粉剂的生产带来了很大的困难。因此，开发制备工艺简单、低毒性、低成本的内酯型槐糖脂制备方法具有重