一种超高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110702831A(43)申请公布日2020.01.17(21)申请号201911127530.1(22)申请日2019.11.18(71)申请人天津汉科生物科技有限公司地址300000天津市天津自贸试验区(空港经济区)环河北路空港商务园东区8号楼A322房间(72)发明人王彬彬(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人董大媛(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图1页(54)发明名称一种超高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒(57)摘要本发明提供了一种超高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒，属于激素检测技术领域，所述试剂盒包括标准品溶液、内标溶液、稀释液、萃取液、解离剂、稳定剂、质控品和色谱柱；所述萃取液包括第一萃取液和第二萃取液；所述第一萃取液为乙酸乙酯与正己烷的混合液；所述第二萃取液为正己烷；所述解离剂为0.4～0.6mol/L的乙酸铵水溶液；所述的稳定剂为0.1～0.3mol/L碳酸钠水溶液。采用本发明所述的试剂盒检测睾酮含量的线性范围、检出限、回收率和精密度均满足要求，灵敏度高、特异性强、准确可靠，可应用于临床血清样本中睾酮激素的定量检测。CN110702831ACN110702831A权利要求书1/1页1.一种高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒，其特征在于，包括标准品溶液、内标溶液、稀释液、萃取液、解离剂、稳定剂、质控品和色谱柱；所述萃取液包括第一萃取液和第二萃取液；所述第一萃取液为乙酸乙酯与正己烷的混合液；所述第二萃取液为正己烷；所述解离剂为0.4～0.6mol/L的乙酸铵水溶液；所述的稳定剂为0.1～0.3mol/L碳酸钠水溶液。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述萃取液中乙酸乙酯与正己烷的体积比为(2.5～3.5):2。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述标准品包括第一标准品和第二标准品；所述第一标准品为100ng/mL的睾酮标准溶液；所述第二标准品为10ng/mL的睾酮标准溶液。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述内标溶液为包括8000～12000pg/mL睾酮-d3的甲醇溶液。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述内标溶液为包括10000pg/mL睾酮-d3的甲醇溶液。6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品为包括睾酮的空白血清基质溶液。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括第一质控品、第二质控品和第三质控品；所述第一质控品中睾酮的浓度为80～120pg/mL，所述第二质控品中睾酮的浓度为1800～2200pg/mL，所述第三质控品中睾酮的浓度为7500～8500pg/mL。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述第一质控品中睾酮的浓度为100pg/mL，所述第二质控品中睾酮的浓度为2000pg/mL，所述第三质控品中睾酮的浓度为8000pg/mL。9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述色谱柱为UPLCC18色谱柱；所述色谱柱的内径为1.0～2.1mm，所述色谱柱的长度为30～150mm，所述色谱柱的填料粒径为1.4～2.0μm。10.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述稀释液包括第一稀释液和第二稀释液；所述第一稀释液为空白血清基质溶液，所述第二稀释液为甲醇。2CN110702831A说明书1/10页一种超高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒技术领域[0001]本发明属于激素检测技术领域，尤其涉及一种高效液相色谱-串联质谱检测血清睾酮激素的试剂盒。背景技术[0002]睾酮是一种类固醇激素，作为内源性激素及同化激素，具有增强肌肉力量、增强免疫力、对抗骨质疏松等功效。血清中睾酮激素的检测在成人及儿科内分泌学和肿瘤学中具有重要的意义。在男性中，睾酮分析主要用于确诊性腺功能低下，还用于评估青春期延迟或性早熟的男孩并监测睾酮治疗的适当性。在女性中，睾酮分析可用于评估雄激素过多症(例如特发性多毛症，先天性肾上腺皮质增生，多囊卵巢综合征和雄激素分泌型卵巢或肾上腺肿瘤)，以及雄激素缺乏症。睾酮在女性和儿童体内的循环浓度非常低(比正常男性低一个数量级)，对于成年女性通常低于0.5ng/mL，儿童和接受抗雄激素治疗的男性，血清中睾酮的含量一般低于0.1ng/mL。因此，要求睾酮激素的检测方法具有高灵敏度。[0003]目前，临床生物样品中内源性激素的测定方法主要采用化学发光免疫法等免疫分析法，但由于免疫分析法中同一抗体可能与多种抗原发生反应，导致其灵敏度与准确度都不足。特别是在儿童和女性的睾酮浓度检测中，免疫