一种蚯蚓多肽及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111905095A(43)申请公布日2020.11.10(21)申请号202010619545.6A61Q19/08(2006.01)(22)申请日2020.06.30C12P39/00(2006.01)C12P21/00(2006.01)(71)申请人广州市科能化妆品科研有限公司C07K1/34(2006.01)地址510800广东省广州市花都区花东镇C12R1/225(2006.01)先科二路23号C12R1/01(2006.01)申请人广东丹姿集团有限公司C12R1/72(2006.01)(72)发明人陈剑晖张慧崔英云黄建珍C12R1/865(2006.01)李传茂张楚标曾伟丹张伟杰C12R1/125(2006.01)(74)专利代理机构北京市万慧达律师事务所11111代理人谢敏楠(51)Int.Cl.A61K38/17(2006.01)A61P39/06(2006.01)A61K8/64(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图2页(54)发明名称一种蚯蚓多肽及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供一种蚯蚓多肽及其制备方法和应用。所述蚯蚓多肽的制备方法包括：发酵步骤：在含有蚯蚓颗粒的浆液中接种混合菌种进行发酵培养，得到发酵液；分离步骤：对所述发酵液进行分离处理，获取含所述蚯蚓多肽的分离产物；其中，所述混合菌种包括乳酸杆菌、保加利亚乳杆菌、双歧杆菌、假交替单胞菌、产阮假丝酵母菌、酿酒酵母菌、纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌中的两种或两种以上的组合。本发明的蚯蚓多肽的分子量更合适，安全性高，且稳定性优异，透皮吸收率高。进一步地，本发明的蚯蚓多肽对皮肤中的细胞的生长或增殖具有良好的促进作用，能够提高皮肤中的细胞再生能力，增加皮肤弹性。CN111905095ACN111905095A权利要求书1/2页1.蚯蚓多肽用于制备促进皮肤细胞生长或增殖的化妆品或药品中的应用，其中所述蚯蚓多肽的分子量为10000D以下。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述蚯蚓多肽的分子量为3000D～8000D；优选地，所述皮肤细胞选自人表皮成纤维细胞，人真皮成纤维细胞，人表皮角化细胞，人表皮角质形成细胞中的一种或多种。3.如权利要求2所述的蚯蚓多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：发酵步骤：在含有蚯蚓颗粒的浆液中接种混合菌种进行发酵培养；分离步骤：对发酵步骤中制得的发酵液进行分离处理；其中，所述混合菌种包括乳酸杆菌、保加利亚乳杆菌、双歧杆菌、假交替单胞菌、产阮假丝酵母菌、酿酒酵母菌、纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌中的两种或两种以上的组合。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述蚯蚓颗粒的浆液中蚯蚓颗粒的含量为1.5-6g/mL，优选为2-5g/mL；优选地，所述混合菌种的总接种量为6×103-9×107CFU/mL；优选为6×105-8×106CFU/mL；优选地，所述混合菌种包括乳酸杆菌、双歧杆菌和酿酒酵母菌中的两种或两种以上的组合；优选地，所述乳酸杆菌、所述双歧杆菌与所述酿酒酵母菌的接种比为0.5～5:0.5～5:1；优选为1～3:1～3:1。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述发酵步骤中，发酵培养前的浆液的pH为5.0～6.8；优选地，所述发酵培养的温度为25～38℃；优选为28～35℃；进一步优选为30～35℃；优选地，所述发酵培养的时间为10～96h；优选为24～72h；进一步优选为45～50h。6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述分离步骤包括：至少将所述发酵液中的数均分子量小于50D；优选小于100D的物质去除，得到第一分离产物；优选地，用透析装置制得第一分离产物；优选地，还包括至少将第一分离产物中数均分子量高于10000D的物质去除，得到含所述蚯蚓多肽的初提液；优选地，利用超滤装置制得含所述蚯蚓多肽的初提液。7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述分离步骤还包括采用不同规格的其它超滤装置，得到不同分子量范围的蚯蚓多肽。8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在发酵步骤之前，还包括将混合菌种接种至活化培养基中进行活化的步骤；优选地，在发酵步骤之前，所述制备方法还包括蚯蚓颗粒制备步骤；优选地，所述蚯蚓颗粒制备步骤包括将蚯蚓浸泡后，对所述蚯蚓进行干燥后粉碎。9.一种组合物，其特征在于，包括按重量百分比计的以下成分：2CN111905095A权利要求书2/2页所述蚯蚓多肽是根据权利要求3-8任一所述的方法制备得到的。10.如权利要求9所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将A相各组分依次加入到乳化锅中加热至85～90℃，均质3-10分钟，优选5分钟后开启搅拌，保温半小时；2)将B相各组分