一种螺旋藻硒多糖的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111978420A(43)申请公布日2020.11.24(21)申请号202010841502.2(22)申请日2020.08.19(71)申请人青岛谦和信科技服务有限公司地址266000山东省青岛市高新区华贯路666号申请人士高（杭州）信息科技有限公司(72)发明人胡兴荣陈传璞王民利其他发明人请求不公开姓名(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种螺旋藻硒多糖的制备方法(57)摘要本发明公开了本发明提出一种螺旋藻硒多糖的制备方法，包括以下步骤：S1、螺旋藻粉前处理：S2、蛋白质分离：S3：纯化粗多糖：S4：硫酸酯化反应：S5：硒酸酯化反应，制得。本发明所述的制备方法，将螺旋藻粉进行球磨前处理，可最大限度的将螺旋藻粉中的杂质除去，且提高多糖的收率，采用进行催化磺化反应，减少位羟基的取代，减少杂质的生成，将螺旋藻硒多糖的产量提升。CN111978420ACN111978420A权利要求书1/1页1.一种螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、前处理：将螺旋藻粉在50℃干燥8-10h，降至室温，30-35℃球磨5-7天；S2、蛋白质分离：将步骤S1处理过的螺旋藻粉与水按照重量比1:1-2溶解，加入混合溶液，充分搅拌后再3000-4000r/min离心20-30min，除去两相界面的蛋白质，收集上层滤液，重复加入混合溶液进行离心洗涤操作5-6次后，最后所得的上层滤液用无水乙醇醇沉至含醇量为80％，在4℃静置24h后，离心收集沉淀物，真空干燥，得到螺旋藻粗多糖；S3、纯化多糖：将步骤S2所得螺旋藻粗多糖用纯化水洗涤3-4次后，在10000-12000r/min离心10-15min，收集沉淀物，真空干燥，得到纯化多糖；S4、硫酸酯化反应：将吡啶冷却至-10～-5℃，缓慢加入氯磺酸，然后加入步骤S3的纯化多糖，在80-90℃下保温1-1.5h，冷却至室温，加入冰水，再加入乙醇，沉淀析出，过滤，得到第一滤饼，将滤饼在50％酒精溶液中进行打浆，升温，再降温至-5-0℃，过滤，得到第二滤饼，在45-50℃下进行干燥，得到螺旋藻多糖硫酸酯化物；S5、硒酸酯化反应：将步骤S4中所得的螺旋藻多糖硫酸酯化物加入到混酸中，加入硒化试剂、助剂，在N2保护的条件下，在60-70℃下，反应6-7h；进行后处理后得到所述螺旋藻硒多糖。2.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述混酸包括浓度为0.6％的硝酸和浓度为0.2％的高氯酸。3.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述硒化试剂为亚硒酸钠或亚硒酸钾中的一种。4.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述助剂为氯化钡。5.根据权利要求1所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述后处理过程为反应结束后，在N2保护的条件下，冷却物料至20-25℃，加入碳酸钠，调节pH＝6-7，过滤，得到一次滤液，一次滤液中再加入适量的无水硫酸钠，搅拌后静置1-2h过滤，得到二次滤液。6.根据权利要求5所述的螺旋藻硒多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤S5中，所述二次滤液，装入透析袋中用流水透析过夜，然后取少量透析液加入抗坏血酸检测，至无红色时停止透析，然后减压蒸馏至稠膏状，用无水乙醇沉淀，在冰箱中放置过夜，抽滤后沉淀用无水乙醇洗涤，真空干燥。2CN111978420A说明书1/6页一种螺旋藻硒多糖的制备方法技术领域[0001]本发明涉及硒多糖制备领域，特别是涉及一种螺旋藻硒多糖的制备方法。背景技术[0002]硒元素是人体必需微量元素，而无机硒具有毒性，安全剂量小，有机硒化物是一类新型化合物，具有抗病毒，抗肿瘤，抗炎，抗衰老，促进生长、保护视觉器官，解毒，防治心血管疾病及预防肝部疾病等药理活性，硒具有独特的生化性质和药理作用，开发含硒化合物极具意义。硒多糖是一种通过多糖与硒的结合且具备硒和多糖两者活性的有机硒化合物。硒多糖的生物活性普遍高于硒和多糖，且更易于被机体吸收和利用，因此硒多糖在免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老等方面具有广泛的应用。[0003]植物或微生物中硒多糖的含量较低，目前人们主要通过以下两种方法获得较高含量的硒多糖：人工硒处理获得富硒植物从而形成天然硒多糖和利用多糖硒化获取人工硒多糖。其中人工硒多糖的制备可将自然界中不含硫酸根的部分植物多糖通过磺化反应等，在多糖分子中引入硫酸基团，再用亚硒酸钠中的亚硒酸根取代多糖分子中的部分硫酸根，进而形成硒酸酯多糖。天然的硒多糖量少，价格昂贵，不利于工业化生产，而人工合成硒多糖的技术较为复杂且硒含