黄绿青霉素的检测方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114487187A(43)申请公布日2022.05.13(21)申请号202210083880.8G01N30/72(2006.01)(22)申请日2022.01.24(71)申请人广东百味佳味业科技股份有限公司地址523000广东省东莞市寮步镇华南工业城松西路3号(72)发明人王胜利叶倩文钟澄立曾海生梁嘉怡(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司44202专利代理师邹敏敏(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/14(2006.01)G01N30/34(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称黄绿青霉素的检测方法(57)摘要本发明提供了一种黄绿青霉素的检测方法，包括提取、净化和测定。其中，提取包括将待测样品采用乙腈‑水溶液进行离心取上层清液，再加入正己烷离心取下层清液；净化包括将下层清液通过固相萃取柱进行净化，取净化液氮吹干后用乙腈定容得待测液；测定包括采用高效液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定待测液的峰面积，再与通过外标法制得的黄绿青霉素浓度‑峰面积标准工作曲线进行计算，得待测样品中的黄绿青霉素浓度，固相萃取柱的吸附剂为由二乙烯苯和N‑乙烯基吡络烷酮聚合成的大孔聚合物。本发明的检测方法可获得更洁净的目标萃取物，基质效应得到显著改善，回收率高，测试重现性好，检测准确度高，能够满足痕量的分析要求。CN114487187ACN114487187A权利要求书1/1页1.一种黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，包括步骤：(1)提取将待测样品采用乙腈‑水溶液进行离心取上层清液，再加入正己烷离心取下层清液；(2)净化将所述下层清液通过固相萃取柱进行净化，取净化液氮吹干后用乙腈定容得待测液；(3)测定采用高效液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定所述待测液的峰面积，再与通过外标法制得的黄绿青霉素浓度‑峰面积标准工作曲线进行计算，得所述待测样品中的黄绿青霉素浓度，所述固相萃取柱的吸附剂为由二乙烯苯和N‑乙烯基吡络烷酮聚合成的大孔聚合物。2.根据权利要求1所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述乙腈‑水溶液中乙腈和水的体积比为3～5:1。3.根据权利要求1所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中对所述待测液利用高效液相色谱仪采用梯度洗脱程序进行分离。4.根据权利要求3所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪采用ThermoAccucoreaQC18色谱柱。5.根据权利要求3所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为甲醇，所述流动相B为含有甲酸的乙酸铵溶液。6.根据权利要求1所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)的质谱条件为：采用HESI离子源正离子模式，喷雾电压为3.5kV，毛细管和喷雾温度分别为320℃和250℃，鞘气和辅助气压力分别设为45arb、8arb，S‑lensRF电压为50V，喷雾气和碰撞气均为氮气，扫描方式采用FullmS/dd‑MS2模式，FullmS一级全扫描范围为100～650m/z，分辨率为70000，自动增益控制AGC、自动注入时间IT分别设为1.0e6和100ms，dd‑MS2数据依赖的二级扫描AGC设为1.0e5，分辨率设为17500，最大IT设为60ms，分离窗口设为2.0m/z。7.根据权利要求6所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)的质谱条件为：母离子质量数为403.21017m/z，碎片离子质量数为139.03871m/z、83.04883m/z，归一化碰撞能为40％。8.根据权利要求1所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述外标法制得的黄绿青霉素浓度‑峰面积标准工作曲线为取黄绿青霉素标准物质，用乙腈配制成1.00mg/L的标准储备溶液，置于4℃冰箱冷藏保存，再分别移取适量标准储备溶液用乙腈配制成浓度分别为100μg/L、50μg/L、20μg/L、10μg/L、5μg/L、2μg/L、1μg/L、0.5μg/L、0.2μg/L的标准工作溶液，再用高效液相色谱‑四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定各所述标准工作溶液的峰面积，再绘制黄绿青霉素浓度‑峰面积标准工作曲线。9.根据权利要求1所述的黄绿青霉素的检测方法，其特征在于，所述待测样品为调味品，所述调味品为生抽、老抽、蚝油或辣椒酱。2CN114487187A说明书1/5页黄绿青霉素的检测方法技术领域[0001]本发明涉及检测技术领域，尤其涉及食品检测技术领域，更加涉及黄绿青霉素的检测方法。背景技术[0002]黄绿青霉素是常见的真菌毒素之一，具有