具有抗肿瘤活性的七肽及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114478701A(43)申请公布日2022.05.13(21)申请号202210270711.5(22)申请日2022.03.18(71)申请人广西民族大学地址530003广西壮族自治区南宁市大学东路188号(72)发明人关一富吴集日边贺东杨林霞(74)专利代理机构南宁新途专利代理事务所(普通合伙)45119专利代理师但玉梅(51)Int.Cl.C07K7/06(2006.01)C07K1/04(2006.01)C07K1/06(2006.01)A61K38/08(2019.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书2页说明书9页(54)发明名称具有抗肿瘤活性的七肽及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供具有抗肿瘤活性的七肽及其制备方法和应用，属于制药技术领域。七肽为具有式(Ⅰ)结构的化合物或其对映异构体或其药物上可接受的盐或前药。七肽采用Fmoc化学的固相合成法以较高的收率及效率合成得到，其中脱Fmoc保护为20％哌啶DMF溶液，缩合试剂为HATU，缩合过程中所用的碱为DIPEA。通过MTT法筛选了该类七肽对结肠癌细胞、肺癌细胞、前列腺癌细胞、黑色素瘤细胞、乳腺癌细胞的细胞毒活性，它们的IC50值为0.18‑22.16μM，具有较好的抗肿瘤活性，在相应药物的研制上有一定的应用前景。CN114478701ACN114478701A权利要求书1/2页1.具有抗肿瘤活性的七肽，其特征在于：所述七肽为具有式(Ⅰ)结构的化合物或其对映异构体或其药物上可接受的盐或前药，其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9各自独立地选自氢、羟基、氨基、羧基、氰基、硝基、三氟甲基、磺酸基、巯基、烷氧基、任何碳链、任何碳环及任何杂环、‑(CH2)k‑杂环基；其中k是1到6的整数；L1、L2、L3、L4、L5、L6和L7各自独立地选自氢或甲基。2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的七肽，其特征在于：所述七肽为下述七肽1‑10或其药物上可接受的盐或前药，3.根据权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的七肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将第一个氨基酸AA‑Fmoc与CTC树脂偶联：将氨基酸AA‑Fmoc、碱collidine溶于DCM中得混合反应液，将混合反应液加入到CTC树脂中并振荡1～2h，滤掉反应液，再分别用DMF、DCM各洗涤树脂两次，得到Fmoc‑AA‑CTC树脂；(2)脱Fmoc保护基团：将Fmoc‑AA‑CTC树脂用体积浓度为20％的哌啶DMF溶液振荡3～10min，滤掉反应液，再分别用DMF、DCM各洗两次，得AA‑CTC树脂；2CN114478701A权利要求书2/2页(3)偶联反应：将下一个氨基酸、HATU、DIPEA溶于DMF中得混合液，然后将混合液加入到AA‑CTC树脂中并振荡1～2h，滤掉液体，再分别用DMF、DCM各洗两次，得含二肽的CTC树脂；(4)按照与步骤(2)和(3)等同的脱Fmoc保护基团、偶联反应操作方法，将含二肽的CTC树脂与其它氨基酸按照七肽的连接顺序依次偶联，即可得到七肽树脂；(5)脱Fmoc保护，接着用CF3CO2H将七肽从树脂上切下，如果氨基酸侧链有保护基，则先脱侧链保护再从树脂上切下，除去溶剂获得粗产品，经HPLC纯化得目标七肽。4.根据权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的七肽在制备抗肿瘤药物中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述抗肿瘤药物是指抗结肠癌药物、抗肺癌药物、抗前列腺癌药物、抗黑色素瘤药物、抗乳腺癌药物。3CN114478701A说明书1/9页具有抗肿瘤活性的七肽及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及属于制药技术领域，具体涉及具有抗肿瘤活性的七肽及其制备方法和应用。背景技术[0002]癌症，又称恶性肿瘤，已成为严重威胁世界各国人民身心健康的重大疾病之一。世界卫生组织2019年的报告显示，在183个国家中，70岁之前由于癌症死亡的人数在其中112个国家排名第一或第二，在其中23个国家排名第三或第四。根据GLOBOCAN2020估计，2020年全球新增癌症病例和死亡病例分别约为1930万和1000万(不包括非黑色素瘤皮肤癌)，癌症新增病例逐年增加，预计2040年全球新增癌症病例将达2840万，比2020年增加47％。由于癌症治疗的严峻形势，迫切需要开发更加高效、低毒的抗癌新药。[0003]多肽是由氨基酸分子以肽键相连的有机化合物，其分子质量一般为1‑10kDa，介于小分子和生物大分子之间。由于多肽具有高度的识别特异性、亲和力及水溶性好等优点，多肽的研究越来越受科研工作者的重视。七肽是指含有七个氨基酸残基的多肽。在合成天然环肽mavacyocines的合成过程中，我们发现