一种高灵敏度检测生物样品甲基汞同位素的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115096986A(43)申请公布日2022.09.23(21)申请号202210744008.3(22)申请日2022.06.28(71)申请人中国科学院地球化学研究所地址550081贵州省贵阳市观山湖区林城西路99号(72)发明人李平王波杨劭晨覃重阳胡焱鑫冯新斌(74)专利代理机构成都环泰专利代理事务所(特殊普通合伙)51242专利代理师覃金龙(51)Int.Cl.G01N27/626(2021.01)G01N30/02(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书2页说明书4页(54)发明名称一种高灵敏度检测生物样品甲基汞同位素的方法(57)摘要本发明公开了一种高灵敏度检测生物样品甲基汞同位素的方法，其直接准确地测量了生物样品甲基汞含量，甲基汞充分提取，没有外源汞的输入，保证了本方法提取的甲基汞同位素比值与实际样品一致，采用离线前处理的方法，增加了生物样品甲基汞同位素分析精度，提高了甲基汞同位素测量过程的可操作性，包括以下步骤：实验前准备、样品前处理过程、回收率和纯度检测、汞同位素检测，该方法通过甲苯、硫酸铜和溴化钠等试剂与生物样品充分震荡混合，使得样品中甲基汞提取到有机相，随后利用硫代硫酸钠溶液将甲基汞从有机相反萃取，以分析样品的甲基汞含量和甲基汞同位素特征，测定硫代硫酸钠溶液甲基汞含量。CN115096986ACN115096986A权利要求书1/2页1.一种高灵敏度检测生物样品甲基汞同位素的方法，包括以下步骤：O1：检测前准备检测耗材及设备：甲苯、硫酸、硝酸、盐酸、溴化钠、无水硫酸铜、硫代硫酸钠、溴酸钾、溴化钾、200mL硼硅玻璃瓶、1000mL硼硅玻璃瓶、15mL聚丙烯离心管、50mL聚丙烯离心管、水平振荡器、马弗炉、离心机、涡旋机、高速离心机和冰箱；将检测所需玻璃器皿浸泡在浓度为20％HNO3溶液中24h以上，完成后用去离子水冲洗三次以上，然后在500℃条件下利用马弗炉烘烧干净；试剂配制：NaBr溶液：利用390mL的H2O溶解155gNaBr，然后加入110mLH2SO4，配制浓度为30％的w/wNaBr溶液；CuSO4溶液：称25g的无水CuSO4到1000mL的H2O中，配制成浓度为2.5％的w/wCuSO4溶液；Na2S2O3溶液：称800mg的Na2S2O3到1000mLH2O中，配制成浓度为0.005mol/L的Na2S2O3溶液；BrCl溶液：准确称取0.76gKBrO3和0.54gKBr到玻璃瓶中，在马弗炉中250℃烧制12h，冷却后加入10mL的H2O和40mL的HCl，配制成0.2mol/L的BrCl；NH2OHHCl溶液：称取25g的NH2OHHCl溶于1000mL的H2O于玻璃瓶中，配制成0.36mol/L的NH2OHHCl溶液。O2：样品处理过程准确称量0.1～1g生物样品到50mL离心管中，加入5mL的30％w/w酸性NaBr溶液和10mL的2.5％w/wCuSO4溶液，称量整个离心管质量，记为m1；加入10mL的甲苯溶液到上述离心管中，称量整个离心管质量，记为m2；利用水平振荡器，将上述溶液以420rpm的速度震荡1.5h，然后利用离心机在3000rpm下离心15min至甲苯相透明；从50mL离心管回收甲苯相到15mL的离心管中，并准确称量回收甲苯相质量，记为m3；向15mL的离心管加入4mL的浓度为0.005mol/LNa2S2O3溶液，先涡旋3min，再震荡30min；利用离心机4000rpm离心15mL离心管30min，尽可能回收硫代硫酸钠相到新离心管中，并存于冰箱待测，该溶液记为S1；准确称量0.1～1g生物样品到50mL离心管中，在离心管中加入5ml浓度为25％的HNO3，在70‑75℃的温度下消解12h，消解完成后，用60℃超纯水定容待测，该溶液记为S2。O3：回收率和纯度检测吸取适量S1溶液，用10％HNO3稀释到适宜浓度，逐步加入0.05mL浓度为0.2mol/L的BrCl溶液直至溶液呈微黄色，放入冰箱12h待测，该溶液记为S3；吸取适量S1溶液，用H2O稀释到适宜浓度，放入冰箱待测，该溶液记为S4；随后利用原子气相色谱法测量S2溶液甲基汞浓度，记为C1；利用冷原子荧光法测量S3溶液总汞浓度，记为C2；利用原子气相色谱法测量S4溶液甲基汞浓度，记为C3；回收率以C3/C1表示，纯度以C3/C2表示，保证样品回收率和纯度高于90％才用于甲基汞同位素分析，以确保检测过程生物样品甲基汞完全被提取，且没有无机汞的引入。O4：汞同位素检测向回收率和纯度高于90％的S1溶液中逐步添加0.05mL的浓度为0.2mol/L的BrCl溶液，2CN115096986A权利要求书2/2页直至溶液呈微黄色，