一种肉珊瑚苷元的制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115160394A(43)申请公布日2022.10.11(21)申请号202210835726.1(22)申请日2022.07.15(71)申请人杭州医学院地址310013浙江省杭州市天目山路182号(72)发明人叶益萍李晓誉黄文康高丽娟(74)专利代理机构杭州求是专利事务所有限公司33200专利代理师陈升华(51)Int.Cl.C07J1/00(2006.01)C07J41/00(2006.01)C07J75/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种肉珊瑚苷元的制备方法(57)摘要本发明公开了一种从黑鳗藤中制备肉珊瑚苷元的方法，属于天然化合物的提取纯化领域，本发明以黑鳗藤的根和茎为起始原料，经粉碎，提取、浓缩、酸水解、碱水解、层析、浓缩、结晶工序生产而成。本发明工艺简单，采用简单的提取纯化工艺，可达到生产高纯度肉珊瑚苷元的质量要求，肉珊瑚苷元纯度可大于99％。本发明肉珊瑚苷元制备工艺总收率可高达0.2％，比传统工艺收率提高了300％。本发明方法周期短，步骤简便，有机溶剂用量少，成本低廉，具备广阔的应用前景。CN115160394ACN115160394A权利要求书1/1页1.一种肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)粉碎：黑鳗藤的根或茎粉碎机粉碎后，得到黑鳗藤粉；2)提取：黑鳗藤粉按液固比2‑15:1加入醇溶液，加热回流提取1‑2h，第一次提取液过滤；滤渣继续按液固比2‑15:1加入醇溶液，加热回流提取1‑2h，第二次提取液过滤，合并二次提取溶液；3)浓缩：将合并的提取溶液减压浓缩得干浸膏；4)酸水解：干浸膏中按液固比5‑15:1加入盐酸醇水溶液，60‑80℃进行搅拌酸水解1‑5h；5)碱水解：酸水解结束后，向酸水解液中加入固体氢氧化钠，在50‑70℃进行搅拌碱水解1‑8h，碱水解结束后，水解液加盐酸调中性，6)大孔树脂吸附：将中和后的碱水解液加水稀释10‑20倍，以3‑6BV/h的流速上S‑8树脂柱，直至上样饱和；洗脱，减压浓缩至干浸膏；7)结晶：第6)步得到的干浸膏按照液固比3‑5:1加入甲醇，50‑60℃溶解，置4‑8℃结晶69～75h，滤取结晶，甲醇润洗；8)重结晶：第7)步得到的结晶中按照液固比15‑30:1加入甲醇，50‑60℃溶解，置4‑8℃结晶69～75h，滤取结晶，甲醇润洗即得肉珊瑚苷元。2.根据权利要求1所述的肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，步骤1)中，黑鳗藤粉的目数为10～50目。3.根据权利要求1所述的肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，步骤2)中，醇溶液为体积百分数20％‑95％的乙醇水溶液或甲醇水溶液，最优选为体积百分数70％的乙醇水溶液。4.根据权利要求1所述的肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，步骤4)中，所述的盐酸醇水溶液中盐酸的浓度为0.1～0.5mol/L。5.根据权利要求1所述的肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，步骤5)中，加入氢氧化钠后的水解液中氢氧化钠终浓度为0.5‑1.5mol/L。6.根据权利要求1所述的肉珊瑚苷元的制备方法，其特征在于，步骤6)中，洗脱具体包括：用水以3‑6BV/h的流速洗脱；再以体积百分数10‑95％乙醇水溶液3‑6BV/h的流速洗脱，收集醇洗脱液。2CN115160394A说明书1/4页一种肉珊瑚苷元的制备方法技术领域[0001]本发明涉及肉珊瑚苷元提取领域，具体涉及一种肉珊瑚苷元的制备方法。背景技术[0002]中国专利ZL201510324854.X公布了肉珊瑚苷元可作为抗抑郁化合物在制备抗抑郁药物和抗抑郁保健食品中的应用。其制备肉珊瑚苷元的方法为以泰山白首乌为原料，乙醇水溶液提取，乙醇提取物再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取物以硫酸甲醇溶液水解，碳酸氢钠中和，浓缩，浓缩物以乙酸乙酯萃取，萃取物即总苷元。总苷元上硅胶柱层析，以二氯甲烷‑甲醇系统洗脱，收集含肉珊瑚苷元部分，再使用十八烷基烷化硅胶反复柱层析，甲醇‑水系统洗脱，合并含肉珊瑚苷元部分，再经甲醇重结晶得到肉珊瑚苷元，得率约0.046％。该发明制备肉珊瑚苷元的步骤繁琐，周期长；使用了乙酸乙酯、二氯甲烷等有机溶剂，易导致环境污染；且使用十八烷基烷化硅胶，制备成本高。[0003]黑鳗藤[Jasminanthesmucronata(Blanco)Merr.]，又名博如藤、白地牛，系萝藦科黑鳗藤属植物，主要分布于浙江、福建、湖南、广东、广西、四川等省，为中国南部地区民间草药，具有强筋骨、祛风湿的功效。我们发现黑鳗藤的主要成分为C21甾体苷，其母核主要为肉珊瑚苷元衍生物，此类衍生物在肉珊瑚苷元的12位及20位羟基上链接着乙酰基、惕各酰基、桂皮酰基、烟酰基、(N‑甲基)邻氨基苯甲酰基等不同的侧链，并在3位