酶法制备头孢克肟的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115558696A(43)申请公布日2023.01.03(21)申请号202211142470.2(22)申请日2022.09.20(71)申请人国药集团威奇达药业有限公司地址037300山西省大同市经济技术开发区第一医药园区(72)发明人刘宏飞白飞幸华龙冯涛王维毅王世珍(74)专利代理机构北京鸿元知识产权代理有限公司11327专利代理师黄丽娟李静(51)Int.Cl.C12P35/00(2006.01)C07D501/12(2006.01)C07D501/22(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称酶法制备头孢克肟的方法(57)摘要本发明属于制药技术领域，涉及一种利用酶法制备头孢克肟的方法。所述方法包括：在水中，在水解酶存在下，在pH为7～8.5，头孢克肟烷基酯进行酶解反应，得到头孢克肟。本发明的利用酶法制备头孢克肟的方法，反应条件变得更温和，反应过程杂质的生成得到了有效的控制，实现了头孢克肟产品质量和收率的双提升。CN115558696ACN115558696A权利要求书1/1页1.一种酶法制备头孢克肟的方法，包括：在水中，在水解酶存在下，在pH为7～8.5，头孢克肟烷基酯进行酶解反应，得到头孢克肟。2.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，所述水解酶是由芽孢杆菌中的嗜热脂肪地芽孢杆菌产生的嗜热菌蛋白酶。3.根据权利要求1或2所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，所述水解酶是固定化的嗜热菌蛋白酶。4.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，所述头孢克肟烷基酯为如下结构的头孢克肟烷基酯，式中，R为C1‑C6的烷基。5.根据权利要求4所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，R为选自甲基、乙基、正丙基和异丙基中任意一个，且优选所述头孢克肟烷基酯为头孢克肟甲酯。6.根据权利要求1‑5中任一项所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，在头孢克肟烷基酯的酶解反应中，相对于每1kg头孢克肟烷基酯，反应液酶活一般控制在106～109U，优选107～108U；头孢克肟烷基酯的加入量为使得在反应液中其浓度为8wt％～20wt％。7.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，所述酶解反应在0℃～30℃下进行；pH采用碱液控制在7～8.5，所述碱液选自二乙胺、三乙胺、N,N‑二异丙基乙胺、碳酸钾水溶液、碳酸氢钾水溶液、碳酸钠水溶液和碳酸氢钠水溶液中的一种或两种。8.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，在酶解反应过程中，通过HPLC检测反应进行至头孢克肟烷基酯残留至头孢克肟烷基酯面积百分比小于0.5％。9.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，在酶解反应完成后，将酶解反应液用酸调节pH至3.8～2，使头孢克肟结晶析出。10.根据权利要求1所述的酶法制备头孢克肟的方法，其特征是，酶解反应液或者经过滤的酶解反应液用酸调节pH至7～6，而后向其中加入活性炭进行搅拌脱色10～30min，过滤出活性炭，得到脱色的酶解反应液；用酸调节pH在3.8～3.6之间，加入晶种，晶种的加入量为头孢克肟烷基酯重量的0.5％～1％，而后继续加入酸调节pH在3.2～3.0之间，搅拌养晶；再继续加入酸调节pH在2.2～2.0后，养晶，随后进行固液分离，固体用水洗涤后干燥得到头孢克肟。2CN115558696A说明书1/4页酶法制备头孢克肟的方法技术领域[0001]本发明属于制药技术领域，涉及一种利用酶法制备头孢克肟的方法。背景技术[0002]头孢克肟是日本藤泽制药株式会社开发的第三代口服头孢菌素，其对β内酰胺酶高度稳定，与青霉素结合蛋白有高度亲和力，可使细菌细胞壁合成受阻，细菌迅速溶解、死亡。对化脓性链球菌、肺炎球菌、无乳链球菌、淋球菌、流感杆菌、摩拉卡他菌及大肠杆菌、肺炎杆菌等多数肠杆菌科细菌具有良好抗菌活性。其化学名称为：(6R,7R)‑7‑[[(z)‑2‑(2‑氨基‑4‑噻唑基)‑2‑[(羧甲氧基)亚氨基]乙酰基]氨基]‑3‑乙烯基‑8‑氧代‑5‑硫杂‑1‑氮杂双环[4.2.0]辛‑2‑烯‑2‑羧酸三水合物，化学式为C16H15N5O7S2·3H2O，结构式如下：[0003][0004]目前文献报道的有关头孢克肟的制备方法概述如下：[0005]中国专利文献CN103467495A公开了一种头孢克肟的制备方法，具体地，在7‑氨基‑3‑乙烯基头孢烷酸(7‑AVCA)与活性酯进行酰化反应，得到头孢克肟甲酯溶液；将头孢克肟甲酯溶液用水萃取，水相中加入活性炭、保险粉和乙二胺四乙酸二钠并搅拌均匀进行脱色，脱色时间为0.15‑1小时，过滤得到头孢克肟甲酯水溶液；上述头孢克肟甲酯水溶液中加入有机溶剂b并于‑10℃至30℃温度下快速