哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取及检测方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115575548A(43)申请公布日2023.01.06(21)申请号202110686156.X(22)申请日2021.06.21(71)申请人内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司地址011517内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔盛乐经济园区(72)发明人曹文慧母智深李洪亮高增丽乌云杨畅(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002专利代理师张璐(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/74(2006.01)权利要求书2页说明书14页附图1页(54)发明名称哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取及检测方法(57)摘要本发明涉及乳制品领域，具体涉及哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取及检测方法。所述提取方法包括：取哺乳动物乳或乳制品的干物质，与分散剂、抗氧化剂和提取试剂混合，而后在50‑100℃、8‑10Mpa下提取。所述检测方法包括：使用前述的提取方法从待测样品中分离得到磷脂提取物后，对其进行检测。本发明中的提取方法可以高效提取出哺乳动物乳中的磷脂物质，且重现性好，简便快速，且可以明显减少萃取溶剂的用量，这使得单个样品的提取费用也显著降低。本发明的检测方法精密度好、回收率高，能够将哺乳动物乳中几种磷脂有效分离，实现对包括PC、PE、PI、PS和SM在内的磷脂物质的准确定性和定量分析。CN115575548ACN115575548A权利要求书1/2页1.一种哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取方法，其特征在于，包括：取哺乳动物乳或乳制品的干物质，与分散剂、抗氧化剂和提取试剂混合，而后在50‑100℃、8‑10Mpa下提取；其中，所述提取试剂选自氯仿、正己烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇中的一种或几种。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述提取试剂至少含有氯仿、二氯甲烷、正己烷中的一种或几种；优选所述提取试剂至少含有氯仿、二氯甲烷中的一种或两种，且其在提取试剂中的体积含量为60％‑75％。3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，所述提取试剂与所述干物质的质量比为3‑10：1。4.根据权利要求1‑3中任一项所述的提取方法，其特征在于，所述分散剂选自硅藻土、海沙中的一种或两种；优选所述分散剂与所述干物质的质量比为1.5‑3：1。5.根据权利要求1‑4中任一项所述的提取方法，其特征在于，所述抗氧化剂为二丁基羟基甲苯和/或丁基羟基茴香醚；优选以提取溶液的质量为基准，所述抗氧化剂的添加量为0.01‑0.05％。6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述提取方法还包括：在所述提取结束后，在真空条件下蒸发除去所得液体中的溶剂，得到磷脂提取物。7.一种哺乳动物乳及乳制品中磷脂的检测方法，其特征在于，包括：使用权利要求1‑6中任一项所述的提取方法从待测样品中分离得到磷脂提取物后，对其进行检测。8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，通过HPLC进行所述检测，其中，色谱柱为正相硅胶色谱柱；采用两元梯度洗脱，流动相A为体积比为75‑90：10‑25：0.2‑0.8：0.05‑0.1的甲醇、水、冰醋酸和三乙胺的混合物；流动相B为体积比为15‑25：40‑55：25‑35的正己烷、异丙醇和流动相A的混合物；流速为1mL/min；柱温为30‑40℃；梯度洗脱程度如下：2CN115575548A权利要求书2/2页9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，在所述HPLC中，检测器为蒸发光散射检测器，以空气作为雾化气，气体压强300‑350kPa，漂移管温度30‑45℃。10.根据权利要求8或9所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括：配制磷脂标准品溶液，通过所述HPLC进行检测分析，以标准品的浓度为横坐标，以峰面积的平均值为纵坐标绘制标准曲线，计算标准曲线方程；将待测样品中磷脂所对应的峰面积代入标准曲线方程中，计算哺乳动物乳中磷脂的浓度。3CN115575548A说明书1/14页哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取及检测方法技术领域[0001]本发明涉及乳制品领域，具体涉及哺乳动物乳及乳制品中磷脂的提取及检测方法。背景技术[0002]极性脂质是乳脂肪球膜中的主要成分，其主要由磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines，PC)，磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine，PE)，磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol，PI)，磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)和鞘磷脂(sphingomyelin，SM)组成。磷脂是构成生物膜的重要物质，也是生命的基础物质之一，与细胞的识别、种特异性和组织免疫功能等有着密不可分的联系，同时磷脂还是食品的重要营养成分和风味前体物质。此外，还有研究表明，磷