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本发明公开了基于高通量测序检测HPV的多重PCR引物组及试剂盒。目前的方法都难以实现HPV高通量样本检测。在检测样本量需求大的时候,需要大量的人力进行操作。本发明建立的方法可通过一步法扩增和纯化,一步法建库,中途不转管,不开盖,有效避免样本之间混淆或者交叉污染;5个小时能够完成96个样本的文库构建,操作简便,能够轻易实现大量样本的检测。通过增加接头引物中样本标签的的数目,可以增加一次测序能够完成的样本检测数目,进一步减少单个样本的平均手工操作时间。