一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115786537A(43)申请公布日2023.03.14(21)申请号202211420774.0(22)申请日2022.11.11(71)申请人西昌学院地址615013四川省凉山彝族自治州西昌市安宁镇学府路1号(72)发明人常卫华王娟红倪国超赵影李昊刘锡辉杨富贵滕悦扬(74)专利代理机构北京鑫瑞森知识产权代理有限公司11961专利代理师史云聪(51)Int.Cl.C12Q1/6888(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书15页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用(57)摘要本发明提供了一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用，属于生物技术诊断领域。本发明使用MX2、DDX58、IRF7、IFIT5、ISG15、RSAD2、PLA2G1B之一或任意组合作为绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，并将其应用到绵羊妊娠期免疫力诊断产品、靶标的制备或构建中，通过采集配种母羊的血液或卵巢，检测血液或卵巢中所述mRNA生物标志物的表达情况，根据其表达情况即可准确预判母羊妊娠期免疫力水平，进而可对绵羊妊娠期疾病进行早期筛查、诊断以及提前干预，对降低母羊死淘率，提高经济效益具有非常重要的意义和作用。CN115786537ACN115786537A权利要求书1/1页1.一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物，其特征在于，所述mRNA生物标志物为下列mRNA生物标志物之一或任意组合：MX2，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；DDX58，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；IRF7，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；IFIT5，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；ISG15，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；RSAD2，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.6所示；PLA2G1B，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.7所示。2.权利要求1所述的mRNA生物标志物在制备绵羊妊娠期免疫力诊断产品中的应用。3.权利要求1所述的mRNA生物标志物在构建绵羊妊娠期免疫力诊断靶标中的应用。4.根据权利要求2～3任一所述的应用，其特征在于，所述应用的具体操作步骤为：(1)检测配种母羊血液或卵巢中所述mRNA生物标志物的表达情况；(2)根据mRNA生物标志物的表达情况预判母羊免疫力水平。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为10～40d。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为10～30d。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为15d。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中的检测方法为PCR检测，所述检测以18s为内参对照。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中的预判方法为：当MX2的表达量≥3.7和/或DDX58的表达量≥4.0和/或IRF7的表达量≥5.2和/或IFIT5的表达量≥3.3和/或ISG15的表达量≥6.9和/或RSAD2的表达量≥5.0和/或PLA2G1B的表达量≥4.0时，预判绵羊妊娠期免疫力高。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述绵羊为多浪羊。2CN115786537A说明书1/15页一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用技术领域[0001]本发明属于生物技术诊断领域，尤其涉及一种用于绵羊妊娠期免疫力诊断的mRNA生物标志物及其应用。背景技术[0002]母羊妊娠时健康与否直接关系到养羊生产的效益，应用生物技术对羊实行早期妊娠免疫因子的筛选，可以在母羊怀孕早期阶段快速地检测出母羊是否健康，从而对母羊进行精心管理和对发病前期的提前干预，防止资源浪费，提高养殖效益。[0003]对于母体的免疫系统来说，在经历妊娠过程时，对其免疫系统是一个极大的挑战：一方面，需要将部分免疫功能进行抑制，从而保护胚胎不会在母体中被过度排斥而发生流产或生长发育受限；另一方面，母体也需要维持部分免疫功能，以保护自身抵御外来病原体的入侵及胚胎植入的过度侵蚀。哺乳动物的胎盘由母胎双方共同形成，是免疫过渡地带。当胎盘的胚胎滋养层细胞对母体子宫内膜进行侵蚀作用时，母体的免疫功能需要得到抑制，才能保证受精卵着床能够顺利完成。囊胚进入子宫，并启动子宫内膜间质细胞一种分化进程，称为蜕膜化。蜕膜化过程在胎床中促使形成广泛血管网，对妊娠的维持和确立都是至关重要的。在妊娠早期，蜕膜中淋巴细胞的调节作用，对妊娠母体的免疫耐受、调节蜕膜细胞分化及与胚胎移植相关的血管生成都很重要，特别是树突细胞(dendr