一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115820839A(43)申请公布日2023.03.21(21)申请号202211412941.7(22)申请日2022.11.11(71)申请人西昌学院地址615013四川省凉山彝族自治州西昌市安宁镇学府路1号(72)发明人常卫华王娟红刘锡辉李昊王思芦倪国超杨富贵滕悦扬(74)专利代理机构北京鑫瑞森知识产权代理有限公司11961专利代理师史云聪(51)Int.Cl.C12Q1/6883(2018.01)C12N15/113(2010.01)权利要求书1页说明书11页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物及其应用(57)摘要本发明提供了一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物及其应用，属于生物技术诊断领域。本发明使用LOC105612389，BGIG9940_27655，RPS28，BGIG9940_27548，BGIG9940_27563之一或任意组合作为绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物，并将其应用到绵羊早期妊娠诊断产品、靶标的制备或构建中，通过采集配种母羊的血液或卵巢，检测血液或卵巢中所述lncRNA生物标志物的表达情况，根据其表达情况即可准确预判母羊是否妊娠。使用本发明的lncRNA生物标志物和应用，能显著提高绵羊早期妊娠诊断效率，对提高母羊繁殖效率，促进集约化管理，提高养殖效益等意义重大。CN115820839ACN115820839A权利要求书1/1页1.一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物，其特征在于，所述lncRNA生物标志物为下列lncRNA生物标志物之一或任意组合：LOC105612389，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；BGIG9940_27655，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；RPS28，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；BGIG9940_27548，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；BGIG9940_27563，其具体核苷酸序列如SEQIDNo.5所示。2.权利要求1所述的lncRNA生物标志物在制备绵羊早期妊娠诊断产品中的应用。3.权利要求1所述的lncRNA生物标志物在构建绵羊早期妊娠诊断靶标中的应用。4.根据权利要求2～3任一所述的应用，其特征在于，所述应用的具体操作步骤为：(1)检测配种母羊血液或卵巢中所述lncRNA生物标志物的表达情况；(2)根据lncRNA生物标志物的表达情况预判母羊是否妊娠。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为10～40d。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为10～30d。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中母羊的配种天数为15d。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中的检测方法为PCR检测，所述检测以18s为内参对照。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中的预判方法为：当LOC105612389的表达量≥3.6和/或BGIG9940_27655的表达量≥6.0和/或RPS28的表达量≥3.3和/或BGIG9940_27548的表达量≥2.5和/或BGIG9940_27563的表达量≥3.4时，预判绵羊妊娠。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述绵羊为多浪羊。2CN115820839A说明书1/11页一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物及其应用技术领域[0001]本发明属于生物技术诊断领域，尤其涉及一种用于绵羊早期妊娠诊断的lncRNA生物标志物及其应用。背景技术[0002]母羊的繁殖力直接关系到养羊生产的效益，应用生物技术对羊实行早期妊娠诊断，可以在母羊怀孕早期阶段快速地检测出母羊是否怀孕，从而对母羊进行分群精心管理和对空怀母羊进行及时补配，同时也是提高母羊繁殖效率，促进集约化管理，提高养殖效益的重要技术措施。[0003]目前常用的母羊早期妊娠诊断方法有阴道检查法、腹腔检查法、乳胶凝集抑制实验诊断法、放射免疫测定法、酶免疫测定法、超声波检测等。其中，阴道检查法主要是使用内窥镜观察阴道粘膜颜色、粘液稀薄程度和子宫颈口的变化进行妊娠诊断。当使用内窥镜观察母羊阴道粘膜时，空怀母羊的阴道粘膜始终为粉红色；若母羊怀孕，一段时间后粘膜会由粉红色变为苍白色；此外，怀孕母羊的阴道粘液量较少，呈透明状且比较粘稠，而未怀孕母羊的粘液量很多，颜色灰白且较为稀薄；妊娠母羊的子宫颈紧闭，子宫颈口处会出现浆糊状的粘块，形成“粘液栓”。此法检查发情配种后60d的母羊，妊娠确诊率可达95％，但由于诊断时间较晚且操作需要一定经验的技术人员，此方法的应用也受到了限制。