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本发明涉及多糖分离纯化方法及应用领域,具体涉及一种酸性莼菜多糖及其分离纯化方法和应用。首先制备粗多糖,然后脱蛋白,采用DEAE?52纤维素柱进行分离,得到了高纯度的酸性莼菜多糖BSP?5,通过红外光谱分析、紫外全波长扫描、高效液相色谱单糖组成分析、凝胶渗透色谱分子量测定等方法对该多糖进行了结构鉴定,结果显示该多糖为性质均一的α构型吡喃糖,由摩尔比为0.08:1.39:1:0.23的D?甘露糖、D?半乳糖、D?木糖和L?岩藻糖组成,是一种酸性杂多糖,平均分子量为119.5KD。体外抗氧化和抗肿瘤实验结果显示本发明分离提纯的酸性莼菜多糖具有较强的抗氧化作用和抗肿瘤生物活性。