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本发明关于一种用于冷冻保存免疫细胞的细胞冷冻保存液及其冷冻保存方法,其中经细胞因子诱导的杀伤细胞尤佳。该细胞冷冻保存液的成分不含血清且由下列成分组成:(1)混合式基础培养基、(2)二甲基亚砜(DMSO)、(3)血清取代物、(4)右旋糖酐(Dextran)。其特征在于该保存液为混合式培养基及血清取代物以达成无血清冷冻保存功能。其用于免疫细胞尤其自然杀手细胞经解冻后可保持80%以上的细胞毒杀功能及功能性细胞标志,并具备高浓度细胞乘载量。