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本发明公开了一种目的基因可调控的工程化免疫细胞及其制备方法和应用,该细胞包括靶细胞和免疫细胞,在所述靶细胞的TCR应答基因位置插入有免疫细胞的目的基因,且所述TCR应答基因与目的基因共用相同的启动子;所述TCR应答基因包括IFN?γ、PD?1、IL?2、4?1BB、TIM3及CTLA?4中的一种;所述目的基因包括IL?15、IL?12、IL?18、IL?21、IL?7、IL?23及CCL19中的一种。该工程化免疫细胞会刺激下游通路,使得TCR应答基因IFN?γ、PD?1、IL?2、4?1BB、TIM3、CTLA?4中任意基因被激活,从而进行高表达,这是由于目的基因与被TCR应答基因共用相同的启动子,所以目的基因进行表达、增强了免疫细胞的杀伤作用、提高了安全性;而当没有靶细胞的刺激时,目的基因不会进行表达,从而实现目的基因的表达受到调控。