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本发明公开了一种构建原位肝癌动物模型的方法,属于动物模型领域。本发明通过筛选得到靶向AXIN1基因、PTEN基因和TP53基因并具有较好编辑能力的sgRNA,其中,特异性靶向AXIN1基因的sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:1?3所示,特异性靶向PTEN基因的sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:4?6所示以及特异性靶向TP53基因的sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:7?9所示;将sgRNA通过串联基因编辑技术,注射到动物肝脏中构建原位肝癌动物模型。通过实验验证,发现将2?3个上述抑癌基因组合构建的敲除模型,3?4个月时已明显成瘤,成瘤率最高可达100%。