一种具有抗肿瘤活性的萜类化合物的分离方法及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850049A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211672255.3A61P35/00(2006.01)(22)申请日2022.12.26A61P1/16(2006.01)A61K31/12(2006.01)(71)申请人中国海洋大学地址266100山东省青岛市崂山区松岭路238号(72)发明人董波韩善浩李建辉祝玉婷于海燕(74)专利代理机构北京识然知识产权代理事务所(普通合伙)11975专利代理师曾庆国(51)Int.Cl.C07C49/21(2006.01)C07C45/78(2006.01)C07C45/79(2006.01)C07C45/80(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图7页(54)发明名称一种具有抗肿瘤活性的萜类化合物的分离方法及其应用(57)摘要本发明提供了一种抗肿瘤萜类化合物的制备方法和应用，本发明从真海鞘被囊中分离纯化到一种新颖的抗肿瘤萜类化合物，该化合物对正常细胞毒性较小。该化合物能够抑制多种肿瘤细胞增殖，尤其是肝细胞癌细胞系。在添加该萜类化合物的培养基中，肝细胞癌细胞系发展促进基因c‑Myc和c‑Met的表达量显著降低，同时抑制肝细胞癌细胞系发展的基因TP53和KEAP1的表达量显著升高。与临床抗肿瘤药物多柔比星的细胞毒性对比显示，在相同添加剂量下，该萜类化合物对肝细胞癌细胞系的细胞毒性与多柔比星类似。表明该化合物不仅为结构新颖的萜类化合物，同时具有良好的体外抗肿瘤效果，有成为抗肿瘤药物先导化合物的可能。CN115850049ACN115850049A权利要求书1/1页1.一种萜类化合物，其特征在于，所述的萜类化合物的化学结构式如下：其中R代表甲基。2.如权利要求1所述的萜类化合物，其特征在于，所述的萜类化合物是将真海鞘的被囊使用乙醇溶液进行提取，提取液依次通过硅胶柱层析分离、硅胶制备板分离和半制备液相分离后制备获得。3.如权利要求2所述的萜类化合物，其特征在于，所述的乙醇溶液进行提取，是将真海鞘被囊打碎后采用95％乙醇浸泡得到真海鞘被囊乙醇提取物。4.如权利要求2所述的萜类化合物，其特征在于，所述的硅胶柱层析使用填充了300‑400目的正相硅胶粉的正相硅胶柱。5.如权利要求2所述的萜类化合物，其特征在于，所述的半制备液相分离，其中流动相体系为甲醇与纯水，梯度洗脱的条件如下：0‑10min,甲醇20％‑50％；10‑20min,甲醇50％‑70％；20‑30min,甲醇70％‑100％；30‑45min,100％甲醇；45‑50min,甲醇100％‑20％。6.权利要求1所述的萜类化合物及其衍生物在抑制肿瘤细胞增殖中的应用。7.权利要求1所述的萜类化合物及其衍生物在制备用于抑制肿瘤细胞增殖的制品中的应用。8.如权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤细胞为肝癌细胞。9.一种抗肿瘤的制品，其特征在于，所述的抗肿瘤制品中包含有权利要求1所述的萜类化合物及其衍生物。10.如权利要求9所述的抗肿瘤的制品，其特征在于，所述的抗肿瘤制品为抗肝癌细胞的制品。2CN115850049A说明书1/5页一种具有抗肿瘤活性的萜类化合物的分离方法及其应用技术领域[0001]本发明属于天然活性物质制备及应用领域，具体涉及一种具有抗肿瘤活性的萜类化合物的分离方法及其应用。背景技术[0002]随着现代生物技术的不断发展，人们对海洋资源认识的不断提高和深入，对于海洋资源的利用也更为广泛，海洋中大量天然结构的活性物质逐渐被发现，这些天然化合物往往具有抗肿瘤、抗微生物、抗病毒和免疫调节等重要功效。大量的海洋生物产物有望成为冶疗人类疾病有效的和特异的良药，许多天然产物可作为临床药物的先导化合物进行研究。恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康。[0003]肿瘤治疗方法之一的化学药物疗法的成效已初步显现，但对于一些死亡率较高的癌症，一些化学药物仍具有毒副作用大，治疗效率低，肿瘤细胞易耐药等问题。因此，寻求高效、毒性小、特异性强的抗肿瘤化学药物意义重大，对解决癌症疾病问题具有深远的影响。[0004]真海鞘(Halocynthiaroretzi)属于于脊索动物门(Chordates)，尾索动物亚门(Urochordata)，海鞘纲(Ascidiacea)。真海鞘的构造可以分为三部分。外部包围着一层坚硬的壳，呈橙红色。壳顶部有生殖根。壳内部为其身体组织，呈橙色。以往的研究表明，真海鞘不仅含有丰富的矿物质元素和多种稀有氨基酸，还含有大量多不饱和脂肪酸，近年来也有关于真海鞘内囊能够预防糖尿病的报道。真海鞘由于生存环境的特殊性导致其含有大量共生微生物，能够产生丰富的次级代谢产物，但目前对于真海鞘为原料制备具有抗肿瘤活性的天然产物的报道还很少。发明内