一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850395A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211058390.9(22)申请日2022.08.31(71)申请人中山大学地址510275广东省广州市海珠区新港西路135号(72)发明人张辉袁耀昌张译文(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102专利代理师孙凤侠(51)Int.Cl.C07K14/11(2006.01)C07K19/00(2006.01)C12N15/70(2006.01)A61K39/145(2006.01)A61P31/16(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表（电子公布）附图3页(54)发明名称一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法。本发明利用流感病毒基质蛋白2胞外域(M2e)和血凝素(HA)，设计了一种流感病毒抗原，并通过在抗原的C端融合foldon基序来形成三聚体结构。在此基础上，本发明通过GvTagOpti/SdCatcher系统制备得到了流感病毒抗原多聚复合物，以所得多聚复合物为免疫原制备得到了可通过呼吸系统接种且免疫保护效果好的流感病毒通用型纳米颗粒疫苗。本发明所述纳米颗粒疫苗不仅免疫保护效果好、接种后可以免受不同亚型的流感病毒的感染，且制备方法简单、安全性高、可较快的应用于临床试验。CN115850395ACN115850395A权利要求书1/1页1.一种流感病毒抗原，其特征在于，所述抗原是以三个重复的流感病毒基质蛋白2胞外域来取代血凝素的头部结构域所形成的融合蛋白。2.根据权利要求1所述抗原，其特征在于，所述抗原的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。3.根据权利要求1或2所述抗原，其特征在于，所述抗原的C端连接有foldon基序。4.一种流感病毒抗原多聚复合物，其特征在于，所述抗原多聚复合物是以权利要求3所述抗原与SEQIDNO.3所示Gv融合表达得到融合蛋白，再将所得融合蛋白与SEQIDNO.4所示Sd‑Ferritin蛋白连接得到。5.权利要求1～3任一所述抗原或权利要求4所述抗原多聚复合物在制备抗流感病毒的药物中的应用。6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述药物为流感病毒通用型疫苗。7.一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗，其特征在于，所述疫苗是以权利要求4所述抗原多聚复合物作为抗原制备得到。8.权利要求7所述流感病毒通用型纳米颗粒疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.在真核表达系统中表达权利要求3所述抗原与SEQIDNO.3所示Gv的融合蛋白并纯化；S2.在原核表达系统中表达SEQIDNO.4所示Sd‑Ferritin蛋白并纯化；S3.将步骤S1所得融合蛋白与步骤S2所得Sd‑Ferritin蛋白在不含酶的缓冲液中孵育得到流感病毒抗原多聚复合物；S4.将步骤S3所得流感病毒抗原多聚复合物与佐剂配制得到流感病毒通用型纳米颗粒疫苗。9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述佐剂为环二鸟苷酸佐剂。10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，流感病毒抗原多聚复合物与环二鸟苷酸佐剂的质量比为5：1～2。2CN115850395A说明书1/5页一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法。背景技术[0002]流感病毒具有通过抗原性漂移而获得逃逸流行的能力，因此需要每年更新季节性流感疫苗的成分以匹配新流行的病毒，但季节性流感疫苗的免疫保护效果并不总是符合预期。因此，迫切需要一种通用型的流感疫苗，该疫苗可引起针对不同流感病毒的广泛交叉保护，减少基于预测季节性主要流通毒株的免疫接种，减轻流感病毒的威胁。[0003]除了寻找合适的免疫原，免疫途径是疫苗开发的另一个重要问题。目前，注射接种是流感疫苗的通用接种方式，但注射接种存在容易引起感染、容易引起不良反应等缺点。鼻内疫苗接种是一种更具吸引力的非侵入性疫苗接种方法，它更安全，可以由未经医学培训的人员进行管理。另由于鼻内疫苗与流感病毒入侵宿主的途径相似，可以刺激分泌型IgA(S‑IgA)抗体大量产生，针对流感病毒提供更出色的保护。但现有可通过呼吸系统接种的流感病毒通用型疫苗较少，免疫保护效果也有待提升。发明内容[0004]本发明要解决的技术问题是克服现有上述通用型流感疫苗所存在的缺陷和不足，提供一种流感病毒通用型纳米颗粒疫苗及其制备方法。[0005]本发明的第一个目的是提供一种流感病毒抗原。[0006]本发明的第二个目的是提供一种流感病毒抗原多聚复合物。[0007]本发明的第三个目的是提供所述抗原或所述抗原多聚复合物在制备抗流感病毒的药物中的应用。[0008