一种低致敏性的酪蛋白的制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850433A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211647378.1C07K1/30(2006.01)(22)申请日2022.12.21C07K1/36(2006.01)(71)申请人中国农业大学地址100091北京市海淀区圆明园西路2号(72)发明人薛文通谢强(74)专利代理机构上海远同律师事务所31307专利代理师胡洁(51)Int.Cl.C07K14/47(2006.01)A23J3/10(2006.01)A23J1/20(2006.01)C12P21/00(2006.01)C07K1/02(2006.01)C07K1/14(2006.01)C07K1/34(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图6页(54)发明名称一种低致敏性的酪蛋白的制备方法(57)摘要本发明涉及一种低致敏性的酪蛋白的制备方法以及采用该制备方法获得的低致敏性的酪蛋白，属于食品生物技术领域；本申请发明人在研究过程中意外发现，当采用“十二烷基硫酸钠和二硫苏糖醇”特定比例的组合对酪蛋白处理后，展开后的线性酪蛋白的致敏性显著降低；具体来说，处理后酪蛋白不仅其球状蛋白结构展开为线性蛋白结构，还意外发现蛋白分子之间还存在聚集，展开和聚集两方面的效应共同导致了酪蛋白上的大部分致敏位点被覆盖，从而降低了酪蛋白的致敏性；本发明的方法操作简单且成本低，能够在不破坏酪蛋白本身营养品质的基础上，显著降低其致敏性。CN115850433ACN115850433A权利要求书1/1页1.一种低致敏性的酪蛋白的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下依次进行的步骤：步骤1)：获取酪蛋白固体；步骤2)：将所述酪蛋白固体在乳化剂的辅助下溶解，获得酪蛋白溶液；步骤3)：将十二烷基硫酸钠和二硫苏糖醇溶解于步骤2)获得的酪蛋白溶液中，并加热至95～120℃，获得经处理的酪蛋白溶液；并且，所述步骤3)中，以所述酪蛋白溶液中含有的酪蛋白固体质量为基准，按照每1g酪蛋白固体，加入1.2～1.5g十二烷基硫酸钠和0.025～0.032二硫苏糖醇；步骤4)：将步骤3)获得的经处理的酪蛋白溶液冷却至室温，分离纯化后获得所述低致敏性的酪蛋白。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中，按照每1g酪蛋白固体，加入1.4g十二烷基硫酸钠和0.03g二硫苏糖醇。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在所述步骤2)中，所述酪蛋白固体在吐温‑80或大豆卵磷脂的辅助下溶解于PBS溶液中，获得酪蛋白溶液。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：在所述步骤2)中，按照每1g所述酪蛋白固体，与0.5～1.5ml的吐温‑80混合，溶解于PBS溶液中；或者，在所述步骤2)中，按照每1g所述酪蛋白固体，与1～2g的大豆卵磷脂混合，溶解于PBS溶液中。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：在所述步骤2)中，将所述获得的酪蛋白溶液置于30～50℃的温度下孵育至少30分钟。6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在所述步骤4)中，所述分离纯化的方法为蛋白透析。7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述蛋白透析的条件为透析温度2‑8℃，透析次数至少4次。8.如权利要求1至7中任意一项所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)获取的酪蛋白固体为从牛奶中提取的酪蛋白固体。9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：从牛奶中提取所述酪蛋白固体的步骤如下：步骤a：取新鲜牛奶，离心后取上清液；其中，离心速度为2500‑3000xg，离心时间为15‑20分钟；步骤b：取步骤a获得的上清液，调节pH至4.5‑4.7，离心取沉淀；步骤c：采用75％乙醇清洗所述步骤b获得的沉淀；步骤d：采用去离子水清洗所述步骤c清洗获得的沉淀；步骤e：将步骤d清洗得到的沉淀进行蛋白透析后，冷冻干燥获得所述步骤1)的酪蛋白固体。10.一种低致敏性的酪蛋白，其特征在于：所述低致敏性的酪蛋白采用权利要求1至9中任意一项所述的制备方法制备获得。2CN115850433A说明书1/7页一种低致敏性的酪蛋白的制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种低致敏性的酪蛋白的制备方法，属于食品生物技术领域。背景技术[0002]食物过敏又称食物变态反应，是指机体对进入人体的食物过敏原(通常是蛋白质)产生的异常免疫应答，通常会导致机体生理功能的紊乱或组织损伤，并引发一系列临床症状，例如皮肤上出现荨麻疹、呼吸道哮喘、咳嗽、胃肠道恶心、呕吐、腹泻等一系列临床症状，严重者休克甚至死亡。[0003]牛奶为八大致敏原之一，主要发生在婴幼儿童中，是大多数婴儿早期接触的第一个致敏原。牛奶蛋白主要由酪蛋白(Casein，CN)和乳清蛋白(Wheyprotein，WP)