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本发明公开了一种毛囊干细胞的制备方法,涉及生物化学技术领域。本发明包括进行干细胞采集,首先对志愿者抽脂50ml,并抽取血液50ml,同时采集一定量的头皮毛囊,对采集样品进行密封和储存;进行细胞分离培养操作,使用隔离器进行封闭式毛囊培养;隔离器在全封闭条件下,将干细胞转移至蜂巢培养系统进行细胞培养扩增;在1?5日后消化获取扩增细胞,并在离心后得到细胞;将细胞由二维贴壁培养模式转变为三维立体悬浮培养,细胞悬浮状态下快速增殖;使用密度梯度离心,毛囊原基增殖。本发明通过进行干细胞采集、分离培养、扩增、离心等环节,对毛囊原基进行增殖,从而实现毛囊干细胞的制备,毛囊干细胞获取难度降低,存量增多。