一种非洲猪瘟病毒的抗原表位肽及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115894718A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211481290.7A61K39/12(2006.01)(22)申请日2022.11.24A61P31/20(2006.01)G01N33/569(2006.01)(71)申请人中国农业科学院上海兽医研究所G01N33/545(2006.01)地址201100上海市闵行区紫月路518号G01N33/58(2006.01)(72)发明人高飞童光志周艳君李丽薇童武郑浩刘长龙姜一峰李国新(74)专利代理机构北京市诚辉律师事务所11430专利代理师范盈(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C07K14/01(2006.01)C07K16/08(2006.01)C12N15/13(2006.01)权利要求书1页说明书8页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种非洲猪瘟病毒的抗原表位肽及其应用(57)摘要本发明公开一种猪瘟抗原表位肽，所述猪瘟抗原表位肽包括非洲猪瘟病毒蛋白p12和p17中的多个抗原表位，而且通过生物信息学分析，对其中个别氨基酸进行了替代或者改变，同时考虑到高级空间结构，个别抗原表位之间通过柔性linker和刚性linker加以连接，充分将其抗原表位进行暴露。经试验验证，所述猪瘟抗原表位肽可诱发实验动物针对非洲猪瘟病毒的免疫反应。CN115894718ACN115894718A权利要求书1/1页1.一种新的非洲猪瘟病毒的抗原表位肽，其特征在于所述抗原表位肽中串联了猪瘟病毒p12和p17蛋白的多个抗原表位，并对其进行了个别氨基酸的替换和改造，实现了抗原表位丰度高、免疫效果好的技术效果。2.如权利要求1所述的非洲猪瘟病毒的抗原表位肽，所述抗原表位肽的具体序列为SEQIDNO.1‑3之一所示。3.如权利要求1或2所述的非洲猪瘟病毒的抗原表位肽的应用，所述应用为制备检测、治疗、预防非洲猪瘟病毒的药物中的用途。4.一种含有权利要求1或2所述非洲猪瘟病毒的抗原表位肽的ELISA检测试剂盒，其中包括：(1)制备包被有权利要求1或2所述非洲猪瘟病毒的抗原表位肽的96孔可拆聚苯乙烯酶联反应板(每孔150ng蛋白)；2×96孔。(2)阳性对照血清：是以非洲猪瘟病毒主要抗原p30、p54和p72重组蛋白免疫制备的高免血清经样品稀释液稀释后，作为试剂盒的阳性对照血清(1管，1.5ml/管)。(3)阴性对照血清：是无特定病原体(SPF)猪血清，作为试剂盒的阴性对照血清(1管，1.5ml/管)。(4)酶标二抗：是以辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG(购自sigma公司，货号A5670)作为原液进行1:30000稀释后制得，2瓶(12ml/瓶)。(5)样品稀释液：为含有5mg/ml酪蛋白的0.01M、pH值为7.4的磷酸盐缓冲液，1瓶(24ml/瓶)。(6)底物液A：为含0.6mg/ml过氧化氢尿素的柠檬酸磷酸盐缓冲液(1瓶，12ml/瓶)(7)底物液B：为0.2mg/ml的四甲基联苯胺(TMB)溶液(1瓶，12ml/瓶)。(8)终止液：2mol/L的硫酸溶液(1瓶，12ml/瓶)。(9)20倍浓缩洗涤液：为含有浓度为0.8％～1.2％(ml/ml)的Tween‑20的0.01M，pH值为7.4的磷酸盐缓冲液(50ml/瓶，2瓶)。5.如权利要求4所述的ELISA检测试剂盒在非疾病的诊断目的中的应用，所述应用为针对环境样品、饲料、猪产品中的非洲猪瘟病毒的检测。6.一种产品，其特征在于所述产品具体为：(a)一种特异性识别如权利要求1或2所述的抗原表位肽的抗体；(b)一种编码所述抗体的核苷酸序列；(c)一种表达载体，包括所述的核苷酸序列；(d)一种宿主，包括所述的表达载体；(e)一种组合物，包括所述的(a)‑(d)中的一种或者多种；优选的，还包括药学上可接受的载体和/或辅料。7.一种权利要求6所述的产品的应用，所述应用为非疾病的诊断和治疗目的的检测，可以用于生物样品、水样、猪场环境等的检测。8.一种产品，其特征在于所述产品具体为：(a’)一种抗所述的抗原表位肽的抗体；(b’)一种编码所述抗体的核苷酸序列；(c’)一种表达载体，包括所述的核苷酸序列；(d’)一种宿主，包括所述的表达载体；(e’)一种组合物，包括所述的(a’)‑(d’)中的一种或者多种；优选的，还包括药学上可接受的载体和/或辅料。9.一种权利要求8所述的产品的应用，所述应用为制备疫苗的应用。所述疫苗为预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染。2CN115894718A说明书1/8页一种非洲猪瘟病毒的抗原表位肽及其应用技术领域[0001]本发明属于生物工程领域，具体地说，涉及一种非洲猪瘟病毒的抗原表位肽及其应用，更具体的，所述抗原表位肽为非洲猪