一种支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102676421A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102676421A(43)申请公布日2012.09.19(21)申请号201210011492.5A61K39/10(2006.01)(22)申请日2012.01.15A61P31/04(2006.01)C12R1/01(2006.01)(83)生物保藏信息CCTCCNO:M20114792011.12.23(71)申请人河南科技大学地址471003河南省洛阳市涧西区西苑路48号(72)发明人赵战勤薛云冯书营(74)专利代理机构郑州睿信知识产权代理有限公司41119代理人牛爱周(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书1212页页附图附图55页(54)发明名称一种支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用(57)摘要本发明涉及一种支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用，该aroA基因缺失菌株aroA-LY1(Bordetellabronchiseptica)，于2011年12月23日保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCCNO：M2011479。本发明的支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株具有很好的免疫保护性，且毒力较弱，对免疫猪无任何不良副作用，跟传统该类疫苗相比更安全。因此，用该亲本菌株构建的基因缺失菌株制成疫苗，具有广阔的市场应用前景。另外，本发明支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株保留了针对支气管败血波氏杆菌感染的免疫保护效力，而且遗传背景清晰，性状稳定，因而具有更好的生物安全性，本发明的支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株不含抗性标记，完全符合疫苗生物安全性要求。CN102674ACN102676421A权利要求书1/1页1.一种不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失菌株，其特征在于：该aroA基因缺失菌株aroA-LY1(Bordetellabronchiseptica)，于2011年12月23日保藏在中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCCNO：M2011479。2.根据权利要求1所述的不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失菌株，其特征在于：所述的不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失了支气管败血波氏杆菌LY1株的营养代谢基因aroA。3.根据权利要求1所述的不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失菌株，其特征在于：不含抗性标记支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株aroA-LY1，其基因工程菌株衍生于支气管败血波氏杆菌LY1株，其中，LY1为分离自猪的野生型支气管败血波氏杆菌强毒菌株，于2011年12月23日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：M2011478。4.根据权利要求1所述的不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失菌株，其特征在于：所述的支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株aroA-LY1缺失了其营养代谢基因aroA1315bp的DNA片段。5.一种不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌缺失菌株在制备支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗方面的应用。6.一种由权利要求1所述的保藏号为CCTCCNO：M2011479的支气管败血波氏杆菌缺失菌株制备的支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗。2CN102676421A说明书1/12页一种支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株及由其制备的疫苗和应用技术领域[0001]本发明涉及一种不含抗性标记的支气管败血波氏杆菌基因缺失菌株，由其构建的疫苗及该疫苗的应用，属于动物细菌基因工程技术领域。背景技术[0002]支气管败血波氏杆菌(Bordetellabronchiseptica，Bb)是一种革兰氏阴性的需氧小杆菌，与专性感染人的百日咳波氏杆菌(B.pertussis，Bp)、副百日咳波氏杆菌(B.parapertussis，Bpp)同属于波氏菌属。Bb可广泛感染多种哺乳动物，猪、兔、犬的感染尤其普遍，表现为呼吸道的急慢性炎症，统称为波氏菌病。在猪群中，支气管败血波氏杆菌可引起猪发生肺炎和萎缩性鼻炎(atrophicrhinitis，AR)，也是猪呼吸道疾病综合征(porcinerespiratorydiseasecomplex，PRDC)的重要致病因子。以萎缩性鼻炎为代表的猪波氏菌病现已遍布养猪业发达国家，世界猪群约有25-50％受感染，给世界养猪业造成严重经济损失，是危害集约化养殖效率的重要呼吸道传染病之一(陈溥言.兽医传染病学.第5版.北京：中国农业出版社，2010.p.260-264.)。更重要的是，支气管败血波氏杆菌的先期感染易于导致其他多种病原，如多杀性巴氏杆菌、链球菌、副猪嗜血杆菌、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流感病毒等的继发感染，从而提高猪群呼吸道疾病的发病率和严重程度，造成重