一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115925785A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202111389745.8A61P35/00(2006.01)(22)申请日2021.11.22(71)申请人苏州大学地址215137江苏省苏州市相城区济学路8号(72)发明人史海斌王安娜(74)专利代理机构苏州创元专利商标事务所有限公司32103专利代理师孙周强陶海锋(51)Int.Cl.C07K5/083(2006.01)C07K1/06(2006.01)C09K11/06(2006.01)A61K41/00(2020.01)A61K49/00(2006.01)权利要求书1页说明书13页附图6页(54)发明名称一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针及其制备方法与应用。本发明的探针Ce6‑Leu在肿瘤微环境的刺激下发生点击缩合反应，继而从纳米颗粒重组装成纳米纤维，具体的，探针Ce6‑Leu在肿瘤细胞内过表达的亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽的刺激下，暴露半胱氨酸结构中原有的氨基和巯基，进而发生点击缩合反应形成两亲性的二聚体，并重组装形成纳米纤维，Ce6结构之间的距离变大，彼此之间的淬灭减弱从而荧光信号和产生ROS的能力增强，从而实现肿瘤的特异性荧光成像和光动力治疗，实现了肿瘤的诊疗一体化，具有重要的科研及经济价值。CN115925785ACN115925785A权利要求书1/1页1.一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针，其特征在于，所述亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针具有如下化学结构式：。2.权利要求1所述亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针在制备肿瘤诊断和/或治疗试剂中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针在肿瘤外为纳米颗粒结构，在肿瘤内为纳米纤维结构。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述治疗为光动力治疗。5.权利要求1所述亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）化合物1与NH2‑CBT反应得到化合物2；（2）化合物2脱掉保护基得到化合物3；（3）化合物3与N‑芴甲氧羰基‑S‑叔丁硫基‑L‑半胱氨酸反应，得到化合物4；（4）化合物4脱去保护基团得到化合物5；（5）化合物5与光敏剂反应，得到化合物6；（6）化合物6脱掉保护基得到化合物7；（7）化合物7与N‑叔丁氧羰基‑L‑亮氨酸反应得到化合物8；（8）化合物8脱掉保护基得到亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，化合物1与NH2‑CBT的摩尔比为1∶1.2；化合物2脱去保护基团在N,N‑二甲基甲酰胺/哌啶混合溶剂中进行；化合物3与N‑芴甲氧羰基‑S‑叔丁硫基‑L‑半胱氨酸的摩尔比为1:1.2。7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，化合物4脱去保护基团在二氯甲烷/三氟乙酸混合溶剂中进行；化合物5与NHS活化的光敏剂的摩尔比为1.1∶1。8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述光敏剂为二氢卟吩E6。9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，化合物6脱去保护基团在N,N‑二甲基甲酰胺/哌啶混合溶剂中进行；化合物7与N‑叔丁氧羰基‑L‑亮氨酸的摩尔比为1∶1.2；化合物8脱去保护基团在二氯甲烷/三氟乙酸混合溶剂中进行。10.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，反应在室温下进行。2CN115925785A说明书1/13页一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于肿瘤微环境介导的重组装技术领域，涉及一种亮氨酸氨基肽酶和谷胱甘肽双重刺激响应型探针及其制备方法和应用。背景技术[0002]癌症已经成为严重危害人类健康的疾病之一，因此，近些年来，用于癌症诊断和治疗的分子影像技术得到了飞速的发展。应用分子影像诊断技术可以对癌症患者进行早期的诊断，并且为癌症的分类、预后评估及治疗方案的选择提供重要的信息，为人类攻克癌症提供新的机会。[0003]诊疗一体化作为一种将疾病的诊断、监测和治疗结合的新兴肿瘤诊疗策略，为克服癌症带来了新的希望；并且该策略效率高，毒副作用小的优点有望推动癌症诊断和治疗技术的快速发展。目前科学家们已经研发出各类造影剂，其中纳米尺寸的造影剂，如纳米乳剂、脂质体、树状聚合物以及基于金、钽、镧系、铋等重金属材料设计的无机纳米多功能造影剂。这类纳米粒子造影剂具有血液循环时间长，肾清除率和毛细血管渗漏率低的优点，能够通过实体瘤的高通透性和滞留作用（enhancedpermeationandretent