基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109852383A(43)申请公布日2019.06.07(21)申请号201811602854.1(22)申请日2018.12.26(71)申请人中国药科大学地址211198江苏省南京市鼓楼区童家巷24号(72)发明人蔡挺彭亚运叶超(74)专利代理机构北京思创大成知识产权代理有限公司11614代理人尹慧晶(51)Int.Cl.C09K11/65(2006.01)B82Y20/00(2011.01)B82Y40/00(2011.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图5页(54)发明名称基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针及其制备方法和应用。该荧光探针是基于富勒烯量子点和二氧化锰纳米片的复合物，通过静电吸附和配位的作用形成具有谷胱甘肽响应的荧光探针，表达成FQD-MnO2，富勒烯量子点结构式为C60(OH)x(NH2)yOz。该荧光探针合成简单，荧光稳定不易淬灭，并且能够与谷胱甘肽(GSH)快速反应，可用于定量检测溶液及细胞内的GSH含量。在GSH存在的条件下，二氧化锰纳米片快速还原成锰离子，同时恢复FQD的荧光。通过建立GSH浓度与FQD荧光恢复强度的线性关系，可以定量检测溶液和细胞内谷胱甘肽的浓度。本发明可以高效快速检测GSH含量，灵敏度高，测量浓度范围广。CN109852383ACN109852383A权利要求书1/1页1.一种基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于该荧光探针表达为FQD-MnO2；其中，FQD为富勒烯量子点，结构式为C60(OH)x(NH2)yOz，x＝13,y＝7,z＝15。2.根据权利要求1所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针的制备方法，其特征在于所述富勒烯量子点粒径小于10nm。3.根据权利要求1所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于富勒烯量子点是通过以下方式制备得到的：在C60粉末中加入过氧化氢和氨水，50-80℃敞口搅拌10-14h，离心后取上清液加入上清液5-7倍体积量的乙醇，静置1-4小时，沉淀，离心后，采用乙醇和水交替洗涤沉淀3次，然后将沉淀置于40-60℃条件下真空干燥，得到富勒烯量子点。4.根据权利要求3所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于将每10mg的C60加入1～10ml的过氧化氢和氨水混合液，其中过氧化氢与氨水的质量浓度分别是30％和28％，体积比为5:2。5.根据权利要求1所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于所述荧光探针是富勒烯量子点与二氧化锰纳米片通过静电吸附及配位键复合而成。6.根据权利要求5所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于富勒烯量子点与二氧化锰纳米片通过静电吸附及配位键复合方法为：向富勒烯量子点水溶液中渐渐加入二氧化锰纳米片水溶液，直到量子点的荧光刚好淬灭接近于0；其中，富勒烯量子点和二氧化锰纳米片的质量比是4:1。7.根据权利要求5所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针，其特征在于所述的二氧化锰纳米片是通过以下方式制备得到的：将含3％的过氧化氢的0.6M的四甲基氢氧化铵水溶液，快速加入0.3M的氯化锰的水溶液中，四甲基氢氧化铵水溶液和氯化锰水溶液的体积比为2:1，敞口快速搅拌过夜，将溶液离心弃去上清，分别用乙醇和水交替洗涤沉淀3次，将洗好的沉淀放在60℃下真空干燥，得到二氧化锰纳米片。8.一种权利要求1所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针的制备方法，其特征在于该方法包括富勒烯量子点的合成、二氧化锰纳米片的制备、富勒烯量子点和二氧化锰纳米片的复合。9.根据权利要求8所述的基于富勒烯的快速高效响应谷胱甘肽的荧光探针的制备方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：a.富勒烯量子点的合成：在C60粉末中加入过氧化氢和氨水，50-80℃敞口搅拌10-14h，离心后取上清液加入上清液5-7倍体积量的乙醇，静置1-4小时沉淀，离心后，采用乙醇和水交替洗涤沉淀3次，洗涤完成后将沉淀放在40-60℃真空干燥过夜，得到富勒烯量子点；b.二氧化锰纳米片的制备：将含3％的过氧化氢的0.6M的四甲基氢氧化铵水溶液，快速加入到0.3M的氯化锰的水溶液中，敞口剧烈搅拌过夜，将溶液离心弃去上清，分别用乙醇和水交替洗涤沉淀3次，将洗好的沉淀放在60℃下真空干燥，得到二氧化锰纳米片；c.富勒烯量子点和二氧化锰纳米片的复合：将得到的富勒烯量子点和二氧化锰纳米片先各自溶于水中，在富勒烯量子点溶液中渐渐加入二氧化锰纳米片溶液，直到量子点的荧光淬灭趋于0；其中，富勒烯量子点