一种抗VEGF抗体体内表达系统的构建和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115927472A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202210784112.5A61P3/10(2006.01)(22)申请日2022.07.05A61P9/10(2006.01)A61P27/02(2006.01)(66)本国优先权数据202110757277.92021.07.05CN(71)申请人武汉纽福斯生物科技有限公司地址430060湖北省武汉市高新大道666号B1栋C270-271(72)发明人李斌李秋棠肖璐张珊珊(74)专利代理机构成都七星天知识产权代理有限公司51253专利代理师杨永梅(51)Int.Cl.C12N15/864(2006.01)A61K9/08(2006.01)权利要求书3页说明书34页A61K39/395(2006.01)序列表9页附图12页(54)发明名称一种抗VEGF抗体体内表达系统的构建和应用(57)摘要本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种表达抗VEGF抗体基因片段系统的构建和应用，用于治疗新生血管增生疾病，包括与年龄相关的黄斑变性，糖尿病黄斑水肿等。具有表达稳定，长期有效，组织损伤风险低等优点。CN115927472ACN115927472A权利要求书1/3页1.一种重组核酸，其特征在于，所述重组核酸编码一个anti‑VEGF重链，所述anti‑VEGF重链的编码序列包含与选自SEQIDNO:5‑6和23‑26中的一个序列有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。2.如权利要求1所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF重链的氨基酸序列包含与选自SEQIDNO:17‑18中的一个序列有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。3.如权利要求1或2所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF重链的互补决定区1(CDR1)，互补决定区2(CDR2)，和互补决定区3(CDR3)的序列分别与SEQIDNO:31，SEQIDNO:32，和SEQIDNO:33相同。4.如权利要求1‑3任一项所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF重链不包含恒定区2(CH2)以及恒定区3(CH3)。5.一种重组核酸，其特征在于，所述重组核酸编码一个anti‑VEGF轻链，所述anti‑VEGF轻链的编码序列包含与选自SEQIDNO:4和19‑22中的一个序列有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。6.如权利要求5所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF轻链的氨基酸序列包含与SEQIDNO:16有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。7.如权利要求5或6所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF轻链的互补决定区1(CDR1)，互补决定区2(CDR2)，和互补决定区3(CDR3)的序列分别与SEQIDNO:28，SEQIDNO:29，和SEQIDNO:30相同。8.如权利要求1‑4任一项所述的重组核酸，其特征在于，所述重组核酸还编码一个anti‑VEGF轻链，所述anti‑VEGF轻链的编码序列包含与选自SEQIDNO:4和19‑22中的一个序列有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。9.如权利要求8所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF轻链的氨基酸序列包含与SEQIDNO:16有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列。10.如权利要求9所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF轻链的互补决定区1(CDR1)，互补决定区2(CDR2)，和互补决定区3(CDR3)的序列分别与SEQIDNO:28，SEQIDNO:29，和SEQIDNO:30相同。11.如权利要求8‑10任一项所述的重组核酸，其特征在于，所述SEQIDNO:4和19‑22以及所述SEQIDNO:5‑6和23‑26的组合为选自表1的一个组合。12.如权利要求8‑10任一项所述的重组核酸，其特征在于，所述SEQIDNO:4和19‑22以及所述SEQIDNO:5‑6和23‑26的组合为选自表3的一个组合。13.如权利要求8‑10任一项所述的重组核酸，其特征在于，所述anti‑VEGF重链的编码序列包含与SEQIDNO:25有≥90％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、≥99％、≥99.5％或100％相同性的序列，所述anti‑VEGF轻链的编码序列包含与SEQIDNO:21