一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115927173A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202210865822.0(22)申请日2022.07.21(71)申请人江苏大学地址212016江苏省镇江市学府路301号(72)发明人许文荣陈深元钱晖孙丰田朱珺彦孙云彤刘中尉一凡(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569专利代理师吴波(51)Int.Cl.C12N5/0775(2010.01)A61K35/28(2015.01)A61P25/00(2006.01)权利要求书1页说明书10页序列表9页附图2页(54)发明名称一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用(57)摘要本发明提供了一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用，属于生物医学技术领域。本发明所述缺氧间充质干细胞外泌体由0.5％～3％氧气浓度预处理40～50h的人脐带间充质干细胞分泌得到。本发明所述外泌体能促进脊髓星形胶质细胞向A2极化，增强脊髓组织神经丝蛋白和微管蛋白的表达，进而促进脊髓组织结构修复，达到脊髓损伤运动功能恢复的效果。CN115927173ACN115927173A权利要求书1/1页1.一种缺氧间充质干细胞来源的外泌体，其特征在于，所述外泌体由0.5％～3％氧气浓度预处理40～50h的人脐带间充质干细胞分泌得到。2.权利要求1所述外泌体的制备方法，其特征在于，将人脐带间充质干细胞于0.5％～3％O2培养40～50h，收集细胞上清液，经过4～6个连续离心处理，得到所述外泌体。3.权利要求1所述缺氧间充质干细胞外泌体或权利要求2所述制备方法得到的外泌体在制备治疗脊髓损伤药物中的应用。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体的注射剂量为2.0～2.5mg。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体能促进脊髓损伤运动功能恢复。6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体能促进脊髓组织结构修复。7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体能促进脊髓组织神经丝蛋白的表达。8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体能增强脊髓组织神经微管蛋白的表达。9.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺氧间充质干细胞外泌体能促进脊髓星形胶质细胞向A2极化。10.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物包括活性成分缺氧间充质干细胞外泌体及药学上可接受的载体。2CN115927173A说明书1/10页一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用技术领域[0001]本发明属于生物医学技术领域，尤其涉及一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用。背景技术[0002]脊髓损伤(SCI)是一种毁灭性的疾病，通常会导致永久性截瘫，给患者带来巨大的身体痛苦和经济损失。脊柱减压手术和大剂量的糖皮质激素(如甲泼尼松龙)是目前主要的临床治疗方法。但是这些治疗方法使患者完全恢复的可能性很低，并且会带来很多副作用。脊髓损伤的病理生理过程与星形胶质细胞极化关系密切。正常情况下，脊髓星形胶质细胞具有广泛的功能，包括神经递质循环、突触发生调节、血脑屏障的形成和维持、环境稳态和免疫信号传导等，一旦中枢神经系统发生创伤或发病，星形胶质细胞就会被诱导激活，并出现A1和A2两种极化状态。A1星形胶质细胞被发现释放补体成分、炎症细胞因子等神经毒性因子，介导神经元和少突胶质细胞死亡，从而促进神经病理进展。相反，A2星形胶质细胞通过产生抗炎细胞因子和神经营养因子表现出神经保护功能，从而促进中枢神经系统的恢复和修复。因此，脊髓损伤后星形胶质细胞不同极化的反应性会影响脊髓功能的恢复。[0003]间充质干细胞来源的外泌体包含许多不同的成分，包括DNA、RNA、脂质、蛋白质和代谢物。外泌体可以通过各自途径到达受体细胞并传递治疗性分子，可以在组织修复、免疫调节和神经保护中发挥重要作用。由于间充质干细胞在体内通常处于干细胞龛的缺氧环境中，因此在体外的缺氧环境更有利于维持它们的增殖、分化和自我更新。但是，目前并没有缺氧预处理间充质干细胞来源的外泌体在治疗脊髓损伤方面的报道。发明内容[0004]有鉴于此，本发明的目的在于提供了一种缺氧间充质干细胞外泌体及其应用，所述缺氧间充质干细胞外泌体能够调控星形胶质细胞向A2型极化，促进脊髓损伤的恢复，改善脊髓损伤大鼠的运动功能。[0005]为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：[0006]一种缺氧间充质干细胞来源的外泌体，所述外泌体由0.5％～3％氧气浓度预处理40～50h的人脐带间充质干细胞分泌得到。[0007]本发明还提供了上述外泌体的制备方法，将人脐带间充质干细胞于0.5％～3％O2培养40～50h，收集细胞上清液，经过4～6个连