一种构树组织培养的培养基及制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115948321A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202310181065.X(22)申请日2023.02.25(71)申请人刘尚文地址430072湖北省武汉市东湖高新区关东街玉龙岛花园二区709栋(72)发明人刘尚文(74)专利代理机构北京智鸿港知识产权代理事务所(普通合伙)16003专利代理师李雪慧(51)Int.Cl.C12N5/04(2006.01)权利要求书2页说明书19页附图1页(54)发明名称一种构树组织培养的培养基及制备方法(57)摘要本发明提出了一种构树组织培养的培养基及制备方法，属于组织培养技术领域。包括两层结构，上层为改进的MS液体培养基，下层为固体凝胶培养基，质量比为10：7‑12。所述固体凝胶培养基为在营养培养基中加入琼脂和硅溶胶，并加入构树叶汁液和磁性抗菌球，不断搅拌形成凝胶，并且磁性抗菌球均匀分散在凝胶层中。本发明培养基可以促进构树组培苗生根，芽苗裂殖快，极大的避免的褐变的发生，提高组织的抗逆性，避免了组织生长发育中将液体培养基中营养素吸收后导致营养素供应不足而造成分裂速度慢、发黄、生长不旺盛等问题，从而极大的促进了构树组织的发育和生长，具有不受季节和气候限制、要求空间小、繁殖技术高、节省劳力等优点，还尽可能的降低了成本。CN115948321ACN115948321A权利要求书1/2页1.一种构树组织培养的培养基，其特征在于，包括两层结构，上层为液体培养基，下层为固体凝胶培养基，质量比为10∶7‑12，其中，每1000mL液体培养基包括：KNO32700‑3000mg、(NH4)2SO4220‑260mg、CaCl2·2H2O320‑340mg、MgSO4·7H2O350‑400mg、NH4H2PO4270‑300mg、KI0.7‑1mg、H3BO36‑8mg、MnSO4·4H2O20‑25mg、ZnSO4·7H2O8‑10mg、Na2MoO4·2H2O0.2‑0.4mg、CuSO4·5H2O0.02‑0.03mg、CoCl2·6H2O0.02‑0.03mg、NaFeEDTA50‑75mg、肌醇90‑110mg、烟酸0.7‑1mg、盐酸硫胺素0.2‑0.4mg、维生素B0.3‑0.7mg、维生素B10.05‑0.15mg、茶多酚80‑90mg、甘氨酸1‑3mg、半胱氨酸20‑40mg、活性炭90‑110mg、氯吡苯脲0.03‑0.05mg、脱叶灵0.02‑0.04mg、纳他霉素10‑15mg、乳酸链球素12‑14mg；所述固体凝胶培养基为在营养培养基中加入琼脂和硅溶胶，并加入鲜嫩构树叶榨取的构树叶汁液和磁性抗菌球，不断搅拌形成凝胶，并且磁性抗菌球均匀分散在凝胶层中。2.根据权利要求1所述构树组织培养的培养基，其特征在于，每1000mL上层液体培养基包括：KNO32887mg、(NH4)2SO4245mg、CaCl2·2H2O332mg、MgSO4·7H2O377mg、NH4H2PO4285mg、KI0.83mg、H3BO36.2mg、MnSO4·4H2O22.5mg、ZnSO4·7H2O8mg、Na2MoO4·2H2O0.25mg、CuSO4·5H2O0.025mg、CoCl2·6H2O0.025mg、NaFeEDTA59.5mg、FeSO4·7H2O21.7mg、肌醇100mg、烟酸0.85mg、盐酸硫胺素0.3mg、维生素B0.5mg、维生素B10.1mg、茶多酚85mg、甘氨酸2mg、半胱氨酸30mg、活性炭100mg、氯吡苯脲0.04mg、脱叶灵0.03mg、纳他霉素12mg、乳酸链球素13mg。3.根据权利要求1所述构树组织培养的培养基，其特征在于，所述硅溶胶的制备方法如下：将正硅酸烷基酯、盐酸、水搅拌混合3‑4h，制得硅溶胶。4.根据权利要求3所述构树组织培养的培养基，其特征在于，所述盐酸的浓度为4‑6mol/L，所述正硅酸烷基酯为正硅酸乙酯或正硅酸甲酯，所述正硅酸烷基酯、盐酸、水的质量比为12‑15∶2‑3∶100‑120。5.根据权利要求1所述构树组织培养的培养基，其特征在于，所述磁性抗菌球的制备方法如下：S1.多孔SiO2中空球的制备：将氨基硅烷滴入含有致孔剂的水溶液中，搅拌反应，离心洗涤，喷雾干燥，得到多孔SiO2中空球；S2.磁性多孔SiO2中空球的制备：将氯化铁、氯化亚铁溶于水中，加入步骤S1制得的多孔SiO2中空球，搅拌混合，惰性气体保护下加入氨水，搅拌反应，磁铁分离，洗涤，干燥，制得磁性多孔SiO2中空球；S3.聚多巴胺改性磁性多孔SiO2中空球的制备：将步骤S2制得的磁性多孔SiO2中空球加入水中，均匀分散，加入多巴胺盐酸盐和催化剂，加热搅拌反应，磁铁分离，洗涤，干燥，制得聚多巴胺