一种构树防褐化组织培养方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115918538A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202211660087.6(22)申请日2022.12.23(71)申请人石河子大学地址832000新疆维吾尔自治区石河子市北四路31号申请人新疆前海种业股份有限公司(72)发明人郭新勇王美张丽刘晓红赵静怡田志佳余香雪(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569专利代理师黄明光(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01G7/04(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种构树防褐化组织培养方法(57)摘要本发明提供了一种构树防褐化组织培养方法，属于植物组织培养技术领域。本发明组织培养方法包括：将构树外植体接种于诱导分化培养基，暗培养至出芽，继续在诱导分化培养基全光照培养或光照周期10‑14h/d培养，进行芽增殖，形成丛生芽后进行生根培养。本发明通过愈伤组织诱导培养阶段暗培养，能够明显降低愈伤组织褐化现象发生，保持愈伤组织呈绿色状态；光暗交替增殖培养获得丛生芽，避免出芽部分白化现象发生。CN115918538ACN115918538A权利要求书1/1页1.一种构树防褐化组织培养方法，其特征在于，将构树外植体接种于诱导分化培养基，暗培养至出芽，继续在诱导分化培养基全光照培养或光照周期10‑14h/d培养，进行芽增殖，形成丛生芽后进行生根培养。2.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述外植体为构树叶片。3.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述外植体进行消毒，包括：流水冲洗1‑1.5h，75％酒精浸泡20‑40s，无菌水冲洗2‑3次，2.5‑5％次氯酸钠浸泡6‑10min，无菌水冲洗2‑3次。4.根据权利要求3所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述外植体进行消毒后，切成0.5‑1.5cm2大小。5.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述诱导分化培养基配方为：MS+6‑BA1.5‑2.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖28‑30g/L+琼脂7‑9g/L。6.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述生根培养基配方为：1/2MS+NAA0.5mg/L+蔗糖28‑30g/L+琼脂7‑9g/L。7.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述生根培养时，光照周期12‑16h/d。8.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述组织培养过程温度控制在25‑28℃。9.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，还包括获得组织培养生根苗后，进行炼苗移栽。10.根据权利要求1所述的构树防褐化组织培养方法，其特征在于，所述构树为杂交构树。2CN115918538A说明书1/6页一种构树防褐化组织培养方法技术领域[0001]本发明属于植物组培养技术领域，尤其涉及一种构树防褐化组织培养方法。背景技术[0002]构树(学名Broussonetiapapyrifera)，桑科构属植物，为落叶乔木，高10‑20m，树皮暗灰色，小枝密生柔毛；具有速生、适应性强、分布广、易繁殖、热量高、轮伐期短的特点；抗污染性强；在中国的温带、热带均有分布。[0003]杂交构树是一种很好的饲料，蛋白质含量较高，含有多种氨基酸，还含有单宁、黄酮、萜类等多种化合物，因其单宁含量较高，在一定程度上可以起到防腐抗氧化，同时也减少了饲料中防腐剂的添加。杂交构树和野生构树均能吸附尘埃、二氧化硫、氟化氢等，大面积种植可防尘治霾。研究表明，构树对铅和锌有较高的富集能力，而且对于镉的吸收富集能力优于其他物种，是土壤和生态环境修复的先锋树种。杂交构树木质部的综纤维素含量高达80％，木质部具有色白、髓芯少、综纤维素含量高等有利于制浆的特点，其韧皮纤维色泽洁白柔软，原浆不经漂白其白度就可达到80％以上，品质优良。以上研究表明杂交构树各项指标符合当今时代对木材纤维原材料的要求，具有极大的发展潜力。另外，构树叶、皮、果实均可入药，树液可治皮肤病，叶片中的黄酮类、酚类等化合物，具有抗菌、抗血小板聚集、抑制芳香化酶、免疫调节、抗癌以及抗细胞毒性等作用，其中黄酮类和生物碱类是主要的药用成分，经济价值很高。[0004]构树包括种子繁育、枝条扦插和组织扩繁等多种育苗方式。其中，种子种植实用性较低，因其种子较小(千粒重仅为2g)，种皮坚硬，田间发芽率不到4％，造成种子的大量浪费和造林中构树种苗的缺乏；而硬枝扦插会形成大量愈伤组织导致消耗过多养分，在愈伤组织表面形成木栓层则会影响插穗和吸收水分，生根困难，插穗下切口愈合组织需3‑10d生长出新根，常因生根慢导致营养物质不足而死亡。组织培养技术是在植