出生前DEHP暴露对子代雄性大鼠生殖系统发育和功能的影响.doc

出生前DEHP暴露对子代雄性大鼠生殖系统发育和功能的影响目的:探讨出生前较低剂量DEHP暴露对子代雄性大鼠生殖系统发育和功能的影响及其可能的作用机制。方法:40只健康SD孕鼠随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和2mg/kg、10mg/kg和50mg/kgDEHP染毒组,每组10只。自G14至G19,每天灌胃染毒。孕鼠从G0至分娩,每天早上称重,并记录孕鼠孕期。孕鼠分娩后,测量雄性幼鼠的体重和肛门生殖孔距离(AGD);此后雄鼠每周测量体重和AGD,断乳后每天观察睾丸下降情况。雄鼠第十周龄时,每窝随机选取1只,每组8只断头处死,取血分离血清,并摘取生殖器官和其他主要脏器,观察各脏器的外观形态,测量其脏器系数。其余雄鼠继续喂养到第十二周龄时,每窝随机选取1只,每组10只进行性行为实验。采用放射免疫分析法测定雄鼠血清睾酮、孕酮、雌二醇和黄体生成素的含量。提取睾丸间充质细胞的mRNA,逆转录成cDNA后采用荧光实时定量PCR分析睾丸甾体类激素合成酶相关基因及胰岛样因子3(insl3)和过氧化物酶体激活物增殖受体γ(PPARγ)的基因表达水平。结果:1.染毒后孕鼠外观无异常,各组孕期和妊娠增重间的差异无统计学意义。2.新生雄鼠10mg/kg和50mg/kg暴露组的平均体重低于对照组,2mg/kg暴露组的平均AGD高于对照组。3.10mg/kg和50mg/kg暴露组的睾丸下降平均日龄与对照组相比出现延迟;各组体重从出生第一周到第八周间的差异有统计学意义,10mg/kg与50mg/kg暴露组的平均体重要低于对照组;出生后到青春期,10mg/kg与50mg/kg暴露组AGD均低于对照组;2mg/kg组前列腺的脏器系数高于对照组。4.2mg/kg组与50mg/kg暴露组骑跨和射精能力低于对照组。5.成年子代雄鼠各组血清睾酮、孕酮和黄体生成素含量之间的差异无统计学意义,50mg/kg暴露组雌二醇含量出现下降。10mg/kg暴露组3β羟化酶(3β-HSD)和胰岛素样因子3(insl3)的基因表达水平低于对照组。结论:1.出生前10mg/kg和50mg/kg剂量DEHP暴露对子代雄鼠的体重和AGD在不同发育阶段有不同影响,具体机制还有待进一步研究。2.出生前2mg/kg剂量DEHP暴露对子代雄鼠生殖系统的生长发育可能具有低剂量效应。3.出生前2mg/kg和50mg/kg剂量DEHP暴露会对子代雄鼠的性行为产生影响,使其交配能力减弱。4.出生前50mg/kg剂量DEHP暴露使雄鼠血清雌二醇含量出现下降。5.出生前10mg/kg剂量DEHP暴露会使成年雄鼠睾丸组织甾体类激素合成关键酶3β羟化酶及胰岛素样因子3基因表达水平下降,但是该基因表达水平变化与血清甾体激素水平的关系还有待进一步研究。