卵巢癌原代细胞的培养基、培养方法及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115975932A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202111198678.1C07D475/00(2006.01)(22)申请日2021.10.14C07D475/12(2006.01)(71)申请人合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司地址230094安徽省合肥市高新区习友路2666号中科院合肥技术创新工程院研发楼主楼801-816室(72)发明人刘青松赫玉影黄涛陈程(74)专利代理机构北京尚诚知识产权代理有限公司11322专利代理师龙淳李巍(51)Int.Cl.C12N5/09(2010.01)C12N5/071(2010.01)C12Q1/02(2006.01)权利要求书8页说明书23页附图15页(54)发明名称卵巢癌原代细胞的培养基、培养方法及其应用(57)摘要本发明提供一种卵巢癌原代细胞的培养基及培养方法。该培养基包含MST1/2激酶抑制剂；丙酮酸钠；毛喉素；表皮生长因子；胃泌素；成纤维细胞生长因子7；烟酰胺；SB431542；和胎牛血清。与现有培养方式相比，使用本发明的培养基进行的体外培养具有更高的扩增效率；用该培养基进行卵巢癌原代的培养，能够维持原发组织的形态结构和病理特征，提高卵巢癌原代细胞培养的成功率和存活率。CN115975932ACN115975932A权利要求书1/8页1.一种卵巢癌原代细胞的培养基，其特征在于，包含：MST1/2激酶抑制剂；丙酮酸钠；毛喉素；表皮生长因子；胃泌素；成纤维细胞生长因子7；烟酰胺；SB431542；和胎牛血清；其中，所述MST1/2激酶抑制剂包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐、或溶剂化物，其中，R1选自C1‑C6烷基、C3‑C6环烷基、C4‑C8环烷基烷基、C2‑C6螺环烷基、以及任选地被1‑2个独立地R6取代的芳基、芳基C1‑C6烷基和杂芳基；R2和R3各自独立地选自C1‑C6烷基；R4和R5各自独立地选自氢、C1‑C6烷基、C3‑C6环烷基、C4‑C8环烷基烷基、C1‑C6烷基羟基、C1‑C6卤代烷基、C1‑C6烷基氨基C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基C1‑C6烷基、和C3‑C6杂环基C1‑C6烷基；R6选自卤素、C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基、和C1‑C6卤代烷基。2.如权利要求1所述的培养基，其中R1选自C1‑C6烷基、C3‑C6环烷基、C4‑C8环烷基烷基、C2‑C6螺环烷基、以及任选地被1‑2个独立地R6取代的苯基、萘基、苯甲基和噻吩基；R2和R3各自独立地选自C1‑C3烷基；R4和R5各自独立地选自氢、C1‑C6烷基、C3‑C6环烷基、C4‑C8环烷基烷基、C1‑C6烷基羟基、C1‑C6卤代烷基、C1‑C6烷基氨基C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基C1‑C6烷基、哌啶基C1‑C6烷基、和四氢吡喃基C1‑C6烷基；R6选自卤素、C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基、和C1‑C6卤代烷基。3.如权利要求1所述的培养基，其中所述MST1/2激酶抑制剂包括式(Ia)的化合物或其药学可接受的盐、或溶剂化物，2CN115975932A权利要求书2/8页其中，R1选自C1‑C6烷基、任选地被1‑2个独立地R6取代的苯基、任选地被1‑2个独立地R6取代的噻吩基、和任选地被1‑2个独立地R6取代的苯甲基；R5选自氢、C1‑C6烷基、和C3‑C6环烷基；R6各自独立地选自卤素、C1‑C6烷基、和C1‑C6卤代烷基。4.如权利要求3所述的培养基，其中R1为任选地被1‑2个独立地R6取代的苯基；R5为氢；R6优选为氟、甲基或三氟甲基。5.如权利要求1所述的培养基，其中所述MST1/2激酶抑制剂选自以下化合物或其药学可接受的盐中的至少一种：3CN115975932A权利要求书3/8页4CN115975932A权利要求书4/8页5CN115975932A权利要求书5/8页6CN115975932A权利要求书6/8页7CN115975932A权利要求书7/8页6.如权利要求1～5中任一项所述的培养基，其特征在于所述培养基中各成分的含量满足以下任意一项或多项或全部满足：(1)所述MST1/2激酶抑制剂在培养基中的含量为2.5～10μM；(2)所述丙酮酸钠在培养基中的含量为0.25～1mM；(3)所述毛喉素在培养基中的含量为2.5～10μM；(4)所述表皮生长因子在培养基中的含量为5～80ng/mL；(5)所述胃泌素在培养基中的含量为3～81nM；(6)所述成纤维细胞生长因子7在培养基中的含量为5～40ng/mL；(7)所述烟酰胺在培养基中的含量为1～16mM；(8)所述SB431542在培养基中的含量为3.75～30μM；(9)所述胎牛血清相对于培养基的体积比为2.5％(v/v)～40％(v/v)。7.如权利