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本发明提供了一种实现肠癌原代细胞体外快速扩增的培养基和培养方法。本发明的肠癌原代细胞培养基包含初始培养基、Rho蛋白酶抑制剂、抗生素、胃泌素、A8301、非必需氨基酸、霍乱毒素、胰岛素样生长因子?1、烟酰胺、胰岛素、胎牛血清、以及选自B27添加剂和N2添加剂中的至少一种的添加剂。通过使用本发明的肠癌原代细胞培养基,能够实现肠癌原代细胞的有效快速扩增,这样扩增得到的细胞保持了患者的病理特性,提高了肠癌原代细胞的培养成功率和细胞扩增速率,可以为患者的个性化治疗提供研究基础。