反相高效液相色谱法测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度.docx

反相高效液相色谱法测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度反相高效液相色谱法测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度【摘要】目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的HPLC?FLD法。方法以DiamonsilTMC18反相柱(250mm×4.6mm，5μm)为色谱柱，流动相为乙腈?0.03mol·L-1醋酸铵(体积比45∶55，调pH=6.0)，流速为0.8mL·min-1，激发波长：235nm，发射波长307nm，以正己烷?异戊醇(体积比95∶5)为提取剂。结果艾司西酞普兰的高(25μg·L-1)、中(10μg·L-1)、低(1.5μg·L-1)3个浓度的平均回收率分别为95.29%、97.01%和97.22%，日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为0.5μg·L-1，线性范围为0.5～50μg·L-1,回归方程为ρ=20.93A-0.015，r=0.9999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速，可用于临床血浓监测和药动学研究。【关键词】艾司西酞普兰;血药浓度;反相高效液相色谱法Abstract:ObjectiveTosetupanRP?HPLCmethodforcontentdeterminationofescitalopraminhumanplasma.MethodsEscitalopramwasextractedwithhexane?isoamylalcohol.TheresidueswereanalyzedonanRP?HPLCcolumn(DiamonsilC18,5μm,4.6mm×250mm)usingamobilephaseconsistingofacetonitrile?0.03mol·L-1NH4Ac(45∶55，pH6.0).Thefluorimetricexcitationandemissionwavelengthwas235and307nm,respectively.ResultsTheaveragerecoveriesofthreeconcentrationsofescitalopram(25,10,1.5μg·L-1)were95.29%,97.01%and97.22%,respectively.Inter?(n=3)andintra?day(n=5)assayRSDwerelessthan15%.Thecalibrationcurvewaslinearovertherangeof0.5-50μg·L-1(r=0.9999,n=7)andthelimitofquantitationforescitalopramwas0.5μg·L-1.ConclusionThemethodissensitive,accurate,preciseandreliableforclinicalmonitoringofplasmaescitalopram.Keywords:escitalopram;plasmaconcentration;RP?HPLC艾司西酞普兰(escitalopram，ETP)是新一代的抗抑郁药物，其对5?羟色胺重吸收抑制剂的相对选择性在同类药物中最高，能有效抑制5?羟色胺的再摄取，具有很强的抗抑郁作用。目前该药由西安杨森制药股份有限公司首次在国内上市。其检测方法国外采用高效液相色谱法[1-2]和LC?MS检测法[3]。为便于进行血药浓度监测和药动学研究，本文参照文献[4]建立了以度洛西汀为内标的测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的HPLC?FLD法。1、仪器与试药1.1仪器Agilent1100HPLC仪配荧光检测器G1321A，G1313A自动进样器，G1311A自动调配泵，G1316A可调柱温恒温箱，Agilent色谱化学工作站(美国惠普);旋涡混合器(原上海医科大学仪器厂);电子天平(瑞士SARTORIUS);MICRO12?24高速离心机(美国);MMM?GROUP真空干燥箱(德国)。1.2药品和试剂草酸艾司西酞普兰对照品(西安杨森制药有限公司，批号：050608，质量分数>99.5%)，内标物为度洛西汀(美国礼来公司，批号：050621，质量分数>99.8%)。乙腈(色谱纯，迪马公司)，水为超纯水，其余均为分析纯。1.3对照品和内标溶液精密称取草酸艾司西酞普兰适量(含艾司西酞普兰10.0mg)加乙腈溶解并定容至10mL，于冰箱4℃避光保存。临用时用乙腈?水(体积比50∶50)稀释成所需浓度的艾司西酞普兰对照品溶液。度洛