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多聚酶链式反应扩增DNA片段.ppt
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多聚酶链式反应扩增DNA片段.ppt
专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片断★PCR的本质是在体外模拟细胞内DNA分子复制的过程★PCR是分子生物学研究中最强大的实验技术之一（一）DNA分子的结构一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二酯键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’，5’-磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端DNA分子
2024-07-01
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《多聚酶链式反应扩增DNA片段》.doc
《多聚酶链式反应扩增DNA片段》教学目标（一）知识与技能1、了解PCR技术的基本操作2、理解PCR的原理3、讨论PCR的应用（二）过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件（三）情感、态度与价值观通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神教学重难点教学重点：PCR的原理和PCR的基本操作教学难点：PCR的原理教学工具多媒体教学过程（一）引入新课在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。
2024-06-02
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《多聚酶链式反应扩增DNA片段》.ppt
多聚酶链式反应扩增DNA片断一、基础知识脱氧核苷酸结构式一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第三位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二脂键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二脂键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二脂键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端O5、DNA分子的空间结构（双螺旋结构）（二）DNA的复制5、原料DNA聚合酶②引物的合成9、精确复制的原因（三）PCR(多聚酶链式
2024-06-27
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1、多聚酶链式反应的概念：是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法，故又称为DNA体外扩增技术1、DNA分子的组成成分和结构脱氧核糖2、DNA分子的平面结构参与的组分解旋酶DNA双链反向平行DNA双链一、PCR的原理（PCR的技术原理）（1）PCR循环--变性（1）PCR循环--变性（1）PCR循环--变性（2）PCR循环—复性（3）PCR循环—延伸（3）PCR循环—延伸（3）PCR循环—延伸（3）PCR循环—延伸二、PCR的反应过程54、循环特点：体内DNA复制与PCR的技术区别：三、PCR反应
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多聚酶链式反应扩增DNA片段多聚酶链式反应扩增DNA片段2.2实验操作步骤2.3按照pcr反应体系配方配制反应液；（2）将pcr反应体系50μl用微量移液器转移到微量离心管（0.5ml）中；（3）将微量离心管放到pcr仪中；（4）设置pcr仪的工作参数。（5）dna在pcr仪中大量扩增。2.4水浴法：将微型离心管依次在95℃、55℃、72℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。3.实验注意事项3.1避免外源dna污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。3.2缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。3.3
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