新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其应用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111624336A(43)申请公布日2020.09.04(21)申请号202010598985.8(22)申请日2020.06.28(71)申请人宁波美丽人生医药生物科技发展有限公司地址315899浙江省宁波市保税西区创业大道7号4幢305室(72)发明人田晓丽(74)专利代理机构无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260代理人石来杰(51)Int.Cl.G01N33/569(2006.01)G01N33/558(2006.01)权利要求书2页说明书4页附图2页(54)发明名称新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其应用方法(57)摘要本发明属于生物检测技术领域，尤其涉及新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物和洗涤液；样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸依次粘贴在反应支持物上，样品垫的一端压覆胶体金垫的一端，胶体金垫的另一端压覆硝酸纤维素膜的一端，吸水滤纸压覆硝酸纤维素膜的另一端，胶体金垫为含有胶体金标记的新型冠状病毒S1重组抗原蛋白、N重组抗原蛋白和鼠IgG抗原蛋白的胶体金垫。本发明还提供了上述检测试剂盒的应用方法。本发明可作为新型冠状病毒抗原检测的补充，减少漏检；不对任何实验仪器、环境或人员具有依赖性，操作简单、方便、检测周期短、易于判读，便于随时随地的监测和检验。CN111624336ACN111624336A权利要求书1/2页1.新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物及洗涤液；所述样品垫、所述胶体金垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水滤纸依次粘贴在所述反应支持物上，所述样品垫的一端压覆所述胶体金垫的一端，所述胶体金垫的另一端压覆所述硝酸纤维素膜的一端，所述吸水滤纸压覆所述硝酸纤维素膜的另一端；所述胶体金垫为含有胶体金标记的新型冠状病毒S1重组抗原蛋白、N重组抗原蛋白和鼠IgG抗原蛋白的胶体金垫；洗涤液包括Tris、氯化钠、牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮和防腐剂。2.根据权利要求1所述新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜设置有第一检测条带、第二检测条带和质控条带，所述第一检测条带、第二检测条带位于所述硝酸纤维素膜靠近所述胶体金垫的一侧，所述第一检测条带含有抗人IgG单克隆抗体，所述第二检测条带含有抗人IgM单克隆抗体，所述质控条带位于所述硝酸纤维素膜远离所述胶体金垫的一侧，且含有羊抗鼠IgG多克隆抗体。3.根据权利要求2所述新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，所述第一检测条带、所述第二检测条带和所述质控条带的长度均为0.35-0.4cm，宽度均为0.5-1mm，所述第一检测条带和所述第二检测条带的间距、所述第二检测条带和所述质控条带的间距均为3.5-4mm。4.根据权利要求1所述新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，所述结合有抗原的胶体金中胶体金颗粒的直径为20-50nm。5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，所述反应支持物的材质为塑料。6.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，所述洗涤液配制时按照每100mL、10～20mM的Tris溶液中含有氯化钠0.9～2.0g、牛血清白蛋白0.3～0.6g、1ml10wt％的PVP-40、PC3000.1～0.5mL进行配制，其中所述Tris溶液的pH为8.0-8.5。7.新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒的应用方法，基于权利要求1-6任一项所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒，其特征在于，包括如下步骤：S1，将待检样本进行稀释液处理，获得处理样本；S2，将步骤S1中处理样本添加洗涤液后滴加至样品垫上，所述处理样本将依次沿着反应支持物上的各个附着物向吸水滤纸的方向移动；S3，若所述处理样本中含有新型冠状病毒IgG抗体和IgM抗体，在经过所述胶体金垫的过程中，与所述胶体金垫标记的新型冠状病毒S1重组抗原蛋白、N重组抗原蛋白特异性结合形成复合物；所述复合物在经过所述硝酸纤维素膜的过程中，依次与抗人IgG单克隆抗体、抗人IgM单克隆抗体特异性结合，则第一检测条带和第二检测条带处出现红色或紫红色，说明所述待测样本为阳性；若所述处理样本中不含有新型冠状病毒的IgG/IgM抗体，则第一检测条带和第二检测条带未出现红色或紫红色，样本为阴性；而胶体金标记的鼠IgG抗原蛋白继续前进与羊抗鼠IgG多克隆抗体结合，质控条带处出现红色或紫红色；S4，如果质控条带处出现红色或紫红色，则表明胶体金标记的鼠IgG抗原蛋白与羊抗鼠IgG多