一种超支化聚合多肽及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108299562A(43)申请公布日2018.07.20(21)申请号201810136900.7(22)申请日2018.02.09(71)申请人中国人民解放军陆军军医大学地址400038重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号(72)发明人李健刘雨青邢孟秋吴玉章(74)专利代理机构北京同恒源知识产权代理有限公司11275代理人赵荣之(51)Int.Cl.C07K17/08(2006.01)A61K39/385(2006.01)A61P25/00(2006.01)A61P37/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表1页附图6页(54)发明名称一种超支化聚合多肽及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种超支化聚合多肽及其制备方法和应用，超支化聚合多肽由超支化聚合物2在氮气保护下通过丁胺氨解分解为聚硫醇，再在氮气保护下逐步加入硫醇烯将巯基转化为硫醚后与多肽聚合而得，其中多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，制得的超支聚合物多肽能刺激抗原提呈细胞活化，与多肽交联后开发治疗多发性硬化症的药物。CN108299562ACN108299562A权利要求书1/1页1.一种超支化聚合多肽，其特征在于：所述超支化聚合多肽由超支化聚合物2在氮气保护下通过丁胺氨解分解为聚硫醇，再在氮气保护下逐步加入硫醇烯将巯基转化为硫醚后与多肽聚合而得，所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；所述超支化聚合物先由十二烷基三硫代碳酸酯与丙烯酸酯在4-二甲氨基吡啶和EDC盐酸盐催化下酯化反应合成十二烷基三硫代碳酸酯-丙烯酸酯，再将引发剂AIBN、十二烷基三硫代碳酸酯-丙烯酸酯、聚乙二醇单乙醚乙酸酯和丙烯酸十八酯在摩尔比为1：10：40：10条件下超支化反应合成。2.根据权利要求1所述超支化聚合多肽，其特征在于：所述酯化反应条件是在氮气保护下反应20min，然后再加入二氯甲烷，40℃震荡反应48h，二氯甲烷在分离漏斗洗涤，有机层干燥后收集，通过旋转蒸发除去二氯甲烷，最终产品在真空下干燥，并回收黄色油即可。3.根据权利要求1所述超支化聚合多肽，其特征在于：所述超支化反应具体为：通氮气保护反应20min，然后60℃搅拌油浴18h，反应结束后，冷水冷却，为了完全除去未反应的单体，产物在正己烷中搅拌6h，每2h更换溶剂，最后将己烷倒出，最终产物经真空干燥回收获得。4.根据权利要求1所述超支化聚合多肽，其特征在于：聚合多肽的方法如下：将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的多肽与超支化聚合物1和丁胺按质量比为1:40:0.1加入水中，然后装入截留分子量3500Da的透析袋，透析，纯化，得超支化聚合多肽。5.权利要求1～4任一项所述超支化聚合多肽在制备多发性硬化症的药物中的应用。2CN108299562A说明书1/5页一种超支化聚合多肽及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物化学领域，涉及用于一种超支化聚合多肽，还涉及超支聚合多肽的制备方法和应用。背景技术[0002]自身免疫病如多发性硬化症是自身反应性T细胞过度活化攻击自身组织引发的疾病，我们认为抗原特异性治疗手段，即通过诱导免疫耐受的方法靶向清除免疫系统中自身反应性T细胞的治疗手段将会是非常好的策略。利用可溶性自身表位特异性肽诱导免疫耐受以治疗自身免疫性疾病在动物模型上显示出一定的治疗效果，但多项临床试验宣布失败。其原因可能包括可溶性肽半衰期短、不能有效刺激抗原提呈进而诱导免疫耐受；可溶性肽在某些动物模型通过静脉给药可能引起过敏性休克等潜在安全性问题。因此，开发新形式的抗原载体附载抗原多肽以增强诱导免疫耐受能力的策略在治疗自身免疫性疾病如多发性硬化症的药物开发中具有应用前景。发明内容[0003]有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种超支化聚合多肽；本发明的目的之二在于提供超支化聚合多肽的应用。[0004]为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：[0005]1、一种超支化聚合多肽，所述超支化聚合多肽由超支化聚合物2在氮气保护下通过丁胺氨解分解为聚硫醇，再在氮气保护下逐步加入硫醇烯将巯基转化为硫醚后与多肽聚合而得，所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；[0006]所述超支化聚合物先由十二烷基三硫代碳酸酯与丙烯酸酯在4-二甲氨基吡啶和EDC盐酸盐催化下酯化反应合成十二烷基三硫代碳酸酯-丙烯酸酯，再将引发剂AIBN、十二烷基三硫代碳酸酯-丙烯酸酯、聚乙二醇单乙醚乙酸酯和丙烯酸十八酯在摩尔比为1：10：40：10条件下超支化反应合成。[0007]优选的，所述酯化反应条件是在氮气保护下反应20min，然后再加入二氯甲烷，40℃震荡反应48h，二氯甲烷在分离漏斗洗涤，有机层干燥后收集，通过旋转蒸发除去二氯甲烷，最终产品在真空下