一种载药纤维环及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109876153A(43)申请公布日2019.06.14(21)申请号201910203979.5A61K47/58(2017.01)(22)申请日2019.03.18A61K49/10(2006.01)A61K49/12(2006.01)(71)申请人东华大学A61P35/00(2006.01)地址201620上海市松江区松江新城人民A61P35/04(2006.01)北路2999号申请人上海市第一人民医院(72)发明人史向阳刘勇肖云超涂文志(74)专利代理机构上海泰能知识产权代理事务所31233代理人黄志达魏峯(51)Int.Cl.A61K47/69(2017.01)A61K31/704(2006.01)A61K47/34(2017.01)A61K47/54(2017.01)权利要求书1页说明书10页附图6页(54)发明名称一种载药纤维环及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种载药纤维环及其制备方法和应用，包括：静电纺丝制备DOX/PLGA载药纳米纤维膜，均质处理得到DOX/PLGA载药纤维环，表面通过超支化PEI螯合Gd(III)用于MR成像，修饰DNA适配体作为靶向分子，紧密结合癌细胞，可有效抑制肿瘤转移和侵袭。本发明制备工艺简单、材料生物安全性好，环状材料更易锚定癌细胞，减少肿瘤细胞的脱落，内部负载的药物可以长期高效作用于肿瘤组织，在杀死癌细胞的同时有效抑制其转移，在癌症治疗领域具有广阔的应用前景。CN109876153ACN109876153A权利要求书1/1页1.一种载药纤维环，其特征在于：为DOX@PLGA-PEI-Gd/aptamer，由DOX@PLGA载药纳米纤维膜经均质处理得到DOX@PLGA载药纤维环，表面通过超支化PEI螯合Gd(III)，并修饰DNA适配体制得。2.一种如权利要求1所述的载药纤维环的制备方法，包括：(1)以PLGA和DOX为原料制得DOX@PLGA纺丝液，静电纺丝，得到DOX@PLGA载药纳米纤维膜；均质处理，离心，弃沉淀；再对上层液再离心，收集沉淀；随后再次分散、离心，冷冻干燥，得到DOX@PLGA载药纤维环；(2)将超支化聚乙烯亚胺PEI溶于二甲基亚砜DMSO中，加入羟基琥珀酰亚胺-四氮杂环十二烷四乙酸NHS-DOTA，搅拌反应，得到PEI-DOTA；随后加入硝酸钆Gd(NO3)3水溶液，继续搅拌反应，经透析、冷冻干燥，得到PEI-DOTA-Gd(III)；(3)将步骤(1)得到的DOX@PLGA载药纤维环分散于超纯水中，活化处理，加入步骤(2)得到的PEI-DOTA-Gd(III)，搅拌反应，随后离心、水洗、冷冻干燥，得到DOX@PLGA-PEI-Gd；(4)将步骤(3)得到的DOX@PLGA-PEI-Gd分散于超纯水中，加入3-马来酰亚胺基丙酸(N-羟基琥珀酰亚胺)酯NHS-Mal，搅拌反应，随后加入三(2-羧乙基)膦TCEP和DNA适配体水溶液，继续搅拌反应，经离心、水洗、冷冻干燥，得到载药纤维环DOX@PLGA-PEI-Gd/aptamer。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中DOX与PLGA的质量比为1～3:20。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中静电纺丝的工艺条件为：纺丝电压20kV，注射泵流速为0.6mL/h，接收距离为15cm，环境温度25℃，湿度30％；均质的工艺条件为：将DOX@PLGA载药纳米纤维膜剪碎，转移至含有氯化钠NaCl和聚乙烯醇PVA的水溶液中，均质机转速为16000rpm，均质处理20min；离心的工艺参数为：1000rpm离心1min；再离心的工艺参数为：5500rpm离心1min；再次分散、离心的操作重复3次。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述NaCl的浓度为1～4M，PVA的浓度为0.25～0.5wt％。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中搅拌反应的工艺参数为：室温下搅拌反应24h；继续搅拌反应的工艺参数：室温下搅拌反应1h。7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中活化处理的工艺条件：向DOX@PLGA载药纤维环分散液中加入EDC的水溶液，磁力搅拌反应30min，然后加入NHS，继续磁力搅拌反应3h；其中，DOX@PLGA载药纤维环与EDC的质量比为8～10:1；EDC与NHS的摩尔比为1:1.2～1.5；搅拌反应的工艺参数为：室温搅拌反应1～3天。8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中DOX@PLGA-PEI-Gd与NHS-Mal的质量比为30:1～2；DNA适配体水溶液的浓度为20～30μM；TCEP与DNA适配体