重组嗜盐菌及其制备方法、应用和用其生产的聚羟基脂肪酸酯.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116024148A(43)申请公布日2023.04.28(21)申请号202211328836.5C12N15/55(2006.01)(22)申请日2022.10.27C12N15/74(2006.01)C12P7/625(2022.01)(83)生物保藏信息C12R1/01(2006.01)GDMCCNo：626352022.07.19(71)申请人华南理工大学地址511400广东省广州市番禺区华南理工大学大学城校区正门(72)发明人叶健文林艺娜谢鑫颖(74)专利代理机构华进联合专利商标代理有限公司44224专利代理师王秉丽(51)Int.Cl.C12N1/21(2006.01)C12N15/53(2006.01)权利要求书1页说明书20页C12N15/54(2006.01)序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称重组嗜盐菌及其制备方法、应用和用其生产的聚羟基脂肪酸酯(57)摘要本发明涉及一种重组嗜盐菌及其制备方法、应用和用其生产的聚羟基脂肪酸酯，该组嗜盐菌，其包含以6‑羟基己酸和葡萄糖为原料生产聚羟基脂肪酸酯的代谢路径，所述聚羟基脂肪酸酯的结构如下式所示：m和n均为正整数。本发明为聚羟基脂肪酸酯及其生产工程菌的开发提供新的解决方案。CN116024148ACN116024148A权利要求书1/1页1.重组嗜盐菌，其特征在于，其包含以6‑羟基己酸和葡萄糖为原料生产聚羟基脂肪酸酯的代谢路径，所述聚羟基脂肪酸酯的结构如下式所示：m和n均为正整数。2.根据权利要求1所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其表达外源的6HHx‑coA转移酶基因，所述6HHx‑coA转移酶基因选自orfz基因、alkK基因、prpE基因、pct540基因、hadA基因或者其组合。3.根据权利要求2所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其还包含以ε‑己内酯为原料生产6‑羟基己酸的代谢路径。4.根据权利要求3所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其表达外源的lactonase基因。5.根据权利要求3所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其还包含以环己烷为原料生产ε‑己内酯的代谢路径。6.根据权利要求5所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其表达外源的p450基因、ADH1基因和BVMO基因。7.根据权利要求2所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其还包含以己二醇为原料生产6‑羟基己酸的代谢路径。8.根据权利要求7所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其表达外源的aldD基因和dhaT基因。9.根据权利要求1至8中任一项所述的重组嗜盐菌，其特征在于，其表达外源的PHA聚合酶基因。10.根据权利要求9所述的重组嗜盐菌，其特征在于，所述PHA聚合酶基因选自phaC1437基因、phaC61‑3基因、phaC4AK4基因、phaCAR基因或者其组合。11.根据权利要求1至8和10中任一项所述的重组嗜盐菌，其特征在于，所述嗜盐菌为HalomonasTD1.0或者Halomonassp.LY01及其二者的衍生菌，所述Halomonassp.LY01的保藏编号为GDMCCNo.62635，已于2022年7月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。12.权利要求1至11任一项所述的重组嗜盐菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括在嗜盐菌中构建所述代谢路径的步骤。13.聚羟基脂肪酸酯的生产方法，其特征在于，所述生产方法包括如下步骤：对权利要求1至11任一项所述的重组嗜盐菌进行发酵，收集菌体，制备聚羟基脂肪酸酯。14.聚羟基脂肪酸酯，其特征在于，所述聚羟基脂肪酸酯的结构如下式所示：m和n均为正整数。2CN116024148A说明书1/20页重组嗜盐菌及其制备方法、应用和用其生产的聚羟基脂肪酸酯技术领域[0001]本发明涉及微生物代谢工程和发酵工程领域，特别涉及一种重组嗜盐菌及其制备方法、应用和用其生产的聚羟基脂肪酸酯。背景技术[0002]聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalkanoates,PHA)，是很多微生物合成的一种细胞内聚酯，是一种天然的高分子生物材料。由于PHA同时具有良好的生物相容性能、生物可降解性和塑料的热加工性能，所以它同时可作为生物医用材料和生物可降解包装材料，因此它已经成为近年来生物材料领域最为活跃的研究热点。PHA还具有非线性光学性、压电性、气体相隔性很多高附加值性能。[0003]传统的聚羟基脂肪酸酯的合成技术方案例如：CN111705029A记载了一种基于嗜盐菌高效生产3‑羟基丙酸(3HP)及其衍生物的方法，涉及重组嗜盐菌(Halobacteriaceae)，其包含生产3‑羟基丙酸(3HP)或其衍生物的代谢路径，其中所述3‑羟基丙酸的衍生物为聚3‑羟基丙酸酯(P3HP)或3‑羟基丙酸与选自