检测新型冠状病毒的PCR引物探针组、试剂盒及应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116024385A(43)申请公布日2023.04.28(21)申请号202211422652.5(22)申请日2022.11.15(71)申请人广州海力特生物科技有限公司地址510000广东省广州市高新技术产业开发区科学城揽月路80号D区第二层218-220、219-221单元(72)发明人朱托夫李海茵吴彩红邓可基(74)专利代理机构武汉派富知识产权代理事务所(普通合伙)42305专利代理师章洪(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/6851(2018.01)C12N15/11(2006.01)C12R1/93(2006.01)权利要求书2页说明书9页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称检测新型冠状病毒的PCR引物探针组、试剂盒及应用(57)摘要本申请公开了检测新型冠状病毒的PCR引物探针组、试剂盒及应用。本申请提供的PCR引物探针组包括检测SARS‑CoV‑2ORF1ab基因区域引物及探针和/或检测N基因区域引物及探针，能有效提高检测区段的覆盖度，构建了高敏感SARS‑CoV‑2ORF1ab/NPCR检测试剂盒及检测方法，该检测方法针对目前5种“需关注的变异株”，包括阿尔法、贝塔、伽马、德尔塔和奥密克戎均可有效检出，与现有技术相比，该检测试剂盒和检测方法用于检测新型冠状病毒时，具有检测灵敏度高、检测精密度高、变异株检测能力强及高检测特异性等优势。CN116024385ACN116024385A权利要求书1/2页1.一种检测新型冠状病毒的PCR引物探针组，其特征在于，所述引物探针组包括：用于检测SARS‑CoV‑2ORF1ab基因的O引物探针组，所述O引物探针组包括用于检测SARS‑CoV‑2ORF1ab基因的ORF1ab‑引物组和ORF1ab‑探针组；所述ORF1ab‑引物组包括第一引物组、第二引物组、第三引物组的至少一个引物组；和/或用于检测SARS‑CoV‑2N基因的N引物探针组；所述N引物探针组包括用于检测SARS‑CoV‑2N基因的N‑引物组和N‑探针组；所述N‑引物组包括第四引物组、第五引物组、第六引物组的至少一个引物组和/或，第七引物组、第八引物组、第九引物组的至少一个引物组；N‑探针组包括第一N‑探针组和/或第二N‑探针组。2.根据权利要求1所述的PCR引物探针组，其特征在于，所述第一引物组包括第一上游引物和第一下游引物；所述第一上游引物包括SEQIDNO:1～4所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第一下游引物包括SEQIDNO:5～8所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第二引物组包括第二上游引物和第二下游引物；所述第二上游引物包括SEQIDNO:9～12所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第二下游引物包括SEQIDNO:13～16所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第三引物组包括第三上游引物和第三下游引物；所述第三上游引物包括SEQIDNO:17～22所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第三下游引物包括SEQIDNO:23～29所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述ORF1ab‑探针组包括SEQIDNO:30～35所示核苷酸序列探针中的至少一条，或为其核苷酸序列的互补序列的探针中的至少一条。3.根据权利要求1所述的PCR引物探针组，其特征在于，所述第四引物组、第五引物组、第六引物组及第一N‑探针组用于检测N基因的A靶标区域；其中，所述第四引物组包括第四上游引物和第四下游引物；所述第四上游引物包括SEQIDNO:36～40所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第四下游引物包括SEQIDNO:41～45所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第五引物组包括第五上游引物和第五下游引物；所述第五上游引物包括SEQIDNO:46～48所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第五下游引物包括SEQIDNO:49～53所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第六引物组包括第六上游引物和第六下游引物；所述第六上游引物包括SEQIDNO:54～58所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第五下游引物包括SEQIDNO:59～63所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第一N‑探针组包括SEQIDNO:64～69所示核苷酸序列探针中的至少一条，或为其核苷酸序列的互补序列的探针中的至少一条。4.根据权利要求1所述的PCR引物探针组，所述第七引物组、第八引物组、第九引物组及第二N‑探针组用于检测N基因的B靶标区域；其中，所述第七引物组包括第七上游引物和第七下游引物；所述第七上游引物包括SEQIDNO:70～73所示核苷酸序列引物中的至少一条引物；所述第七下游引物包括SEQIDNO:74～77所示核苷酸序列引物