一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114150029A(43)申请公布日2022.03.08(21)申请号202111437282.8(22)申请日2021.11.29(71)申请人江南大学地址214122江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号(72)发明人陈磊唐璐莹孙延辉葛佩佩丁重阳陈献忠(74)专利代理机构苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)32257代理人夏苏娟(51)Int.Cl.C12P19/14(2006.01)C12P19/04(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图6页(54)发明名称一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法(57)摘要本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法。本发明是针对超支化多糖的糖苷键构成，采用纤维素酶或β‑葡萄糖苷酶处理的方法，有效切断其中的糖苷键，获得了多糖降解产物，酶解后，得到的多糖降解产物分子量显著降低。酶法降解具有特异性强、反应条件温和、过程可控、绿色高效等优点，且降解时不破坏底物的基团结构，是实现超支化多糖有效降解的重要工具。针对虎奶菇超支化多糖的结构特点，本发明采用对其中大量存在的糖苷键具有降解作用的纤维素酶或β‑葡萄糖苷酶，通过控制酶解条件，生成低分子量的多糖降解产物和还原糖，为超支化多糖的结构改性和高附加值产品的开发奠定基础。CN114150029ACN114150029A权利要求书1/1页1.一种虎奶菇超支化多糖降解物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)向虎奶菇超支化多糖溶液中加入活化后的酶溶液，反应，得到混合溶液；所述酶溶液为纤维素酶溶液或β‑葡萄糖苷酶溶液；(2)将所述混合溶液中的酶灭活，得到酶解液；对所述酶解液除杂，得到所述虎奶菇超支化多糖降解物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述虎奶菇超支化多糖溶液的浓度为5‑25mg/mL。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶溶液的浓度为2‑100U/mL；所述β‑葡萄糖苷酶溶液的浓度为0.2‑30U/mL。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，活化的时间为10‑20min；活化的温度为：纤维素酶30‑60℃，β‑葡萄糖苷酶40‑55℃。5.根据权利要求1‑3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述酶溶液和虎奶菇超支化多糖溶液的体积比为1‑2：1‑2。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，反应的时间为1‑3h，反应的pH为4‑6.8；反应的温度为：纤维素酶30‑60℃，β‑葡萄糖苷酶40‑55℃。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，灭活的方法为，80‑100℃加热5‑15min。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，除杂时透析的截留量为3000‑4000Da。9.一种如权利要求1‑8任一项所述的制备方法制备得到的虎奶菇超支化多糖降解物。10.纤维素酶溶液或β‑葡萄糖苷酶溶液在制备虎奶菇超支化多糖降解物的应用。2CN114150029A说明书1/7页一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法。背景技术[0002]虎奶菇(Pleurotustuber‑regium，PTR)，学名菌核侧耳，是热带、亚热带地区一种珍稀食药两用真菌，富含蛋白质、多糖等活性物质，具有较高的营养价值和药用价值。虎奶菇多糖是一种典型的天然超支化多糖，其分子内部存在很多空腔，外围则有着大量能进行功能化改性的端基官能团，不仅具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、增强人体免疫能力等多种生物活性，在食品、材料及生物医学等方面均也具有巨大的应用潜力。天然提取的虎奶菇超支化多糖分子量约为106g/mol，分支度为0.45‑0.70，由于分子量较大、结构过于紧凑、球形结构内部存在空间位阻，因而在实际应用中受到了一定限制。[0003]因此，对虎奶菇多糖进行降解改性，使其低分子量和分支度降低至合适范围，有助于增加其溶解性、降低分子尺寸，进而提高功能性和生物活性，促进虎奶菇超支化多糖在食品、药品等领域研究和应用价值的进一步开发。传统的多糖降解多采用化学法和/或物理法，虽然普适性强但存在一定缺陷，如：反应条件极端、能耗高、过程规律性差难以控制、产生有害物质污染环境等。此外，由于超支化多糖表观上呈紧凑的准球状，超声降解等方法对其作用效果也不佳，难以破坏分子内部的糖苷键，缺少能够有效对虎奶菇超支化多糖降解的方法。发明内容[0004]本发明旨在解决上述技术问题，提供一种虎奶菇超支化多糖降解物的制备方法，包括以下步骤：[0005](1)向虎奶菇超支化多糖溶液中加入活