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本发明公开了检测新型冠状病毒病原体核酸的检测试剂盒及其使用方法。该检测试剂盒含有液体试剂,液体试剂含有冻干保护剂和SEQIDNO:1?3,SEQIDNO:4?6,SEQIDNO:7?9所示的核苷酸序列;所述冻干保护剂含3%?13%海藻糖,2%?5%葡聚糖,1%?2.5%PEG?20000,0.01mg?0.02mg/mlBSA蛋白。该检测试剂盒将新型冠状病毒的检测集成在一个耗材内,同时采用冻干工艺,提高试剂稳定性,单人份一次性使用,只需一次采样、一步操作,极大地解放了实验操作人员,降低检测成本,同时减少患者不便,减轻患者经济负担。准确性高,检测灵敏。