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本发明涉及谷胱甘肽纳米微球制备技术领域,公开一种肠溶缓释型高活性谷胱甘肽纳米微球的制备方法,包括以下步骤:(1)向包埋蛋白的溶液中加入谷胱甘肽GSH,混合均匀得到混合液;(2)将混合液经静电喷雾设备喷出,并接收得到谷胱甘肽纳米微球;包埋蛋白的溶液为玉米醇溶蛋白、小麦醇溶蛋白或椰肉醇溶蛋白的乙醇水溶液;包埋蛋白的质量浓度≥14%。本发明方法制备的谷胱甘肽纳米微球粒径小,分散性好,谷胱甘肽的包覆率高,谷胱甘肽在存放过程中的稳定性高,同时在肠道中具有更高的释放效率,在功能性食品、特殊医学用途配方食品、特殊膳食用食品等领域具有很好的应用前景。