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本发明属于兽药中有效成分检测领域,提供了一种茵陈金花散中多种活性成分的同时测定方法,包括如下步骤:采用萃取剂对茵陈金花散样品进行超声萃取,离心、过滤,得提取液;采用超高效液相色谱法对多种主要成分同时进行定性定量检测,采用多通道色谱检测和3D扫描光谱图;色谱柱为WatersUPLCHSST3色谱柱;梯度洗脱:甲醇?1mol/L醋酸铵溶液(99∶1)为流动相A,水?1mol/L醋酸铵溶液(99∶1)为流动相B,并对梯度洗脱程序进行了优化和探索。本发明的方法简便快速、分离效果好,测定精度高,结果重现性好,易于观察,专属性强,色谱峰峰形良好,既达到中国兽药典的要求,又节省时间、试剂。