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本发明公开了一种小鼠肾小球壁层上皮细胞的提取和培养方法。本发明的小鼠肾小球壁层上皮细胞的提取和培养方法包括:从小鼠肾皮质组织中提取肾小球;小鼠肾小球壁层上皮细胞的原代培养、传代以及传代后的维持培养。本发明采用细胞筛联合磁性分离的方法可成功分离提取肾小球,培养原代PECs;经鉴定,本发明培养的原代PECs表达PECs特异性标志蛋白claudin?1,未表达足细胞标志物nephrin,近端小管标志物aquaporin?1和系膜细胞蛋白α?SMA。本发明体外培养的PECs传至6代后仍表达标志蛋白,具有分化潜能,为进一步深入研究PECs的生物学特性及与肾小球疾病的关系提供了基础。