采后病害的生物防治.ppt

一、实验目的1.通过用生防菌、靶标菌在采后果实的分别接种，掌握水果蔬菜生物防治的方法。生防酵母菌的筛选与活性测定。2.观察不同类型的生防菌对植物病原菌的生防效果，了解生物防治的重要性。二、实验原理将生防菌与病原菌菌分别组合接种在果实上，储藏后，观察生防菌对病原菌的拮抗活性。观察生防菌的防治作用等。三、实验材料1.果实材料：苹果2.病原：苹果炭疽菌(Glomerellacingulata)3.生防菌：放线菌四、实验操作(一)打孔法1.果实表面消毒。选择外观整齐、无病虫危害的健康苹果用2%的NaOCl表面消毒2min，再冲洗，晾干后，备用。或用酒精表面消毒。2.打孔。用消毒的直径为4mm的打孔器在苹果果实腰部一圈打孔4个，孔直径（d）3-5mm，深度3-4mm，用无菌棉吸干孔内汁液。3.分别配制苹果炭疽病菌、生防菌的孢子悬浮液。每个纯化培养皿加无菌水6-8毫升，用刮产混匀，备用。4.接种。每孔分接种20-30l微升，用胶带封住接种孔。接种组合如下：孔1、孔3：苹果炭疽病菌；孔2、孔4：苹果炭疽病菌+生防菌。将果实单个放在托盘上，外套一塑料袋以保持95%左右的相对湿度，置于25C下贮藏或装入塑料筐内在室温下7天贮藏。用只接种病原菌、无菌水的苹果分别作为阳性和阴性对照。或者先接种酵母菌悬液，25C下放置24h后，再接种青霉、炭疽病原菌孢子悬浮液30l，放入培养箱（25C）中培养3-5天。(二)表面涂抹法活性酵母菌菌株的筛选1.在13℃-15℃贮藏条件下进一步进行筛选2.酵母培养液稀释3种不同浓度3.将酵母培养液均匀涂抹于苹果表面上，放置2-3天待酵母菌在苹果表面定植后，在炭疽菌和青霉菌孢子悬浮液浸泡/喷洒30min.4.晾干后将果实单个放在托盘上，外套一塑料袋以保持95%左右的相对湿度，置于上述温度下贮藏。每一菌株重复3次，用只接种病原菌的苹果作对照。五、实验结果记录测定果实的发病率及病斑直径。观察不同类型的生防菌对植物病原菌的生防效果；绘制接种方法图。