01-蛋白质的表达、分离、纯化实验.doc

HYPERLINK"http://www.biomart.cn/experiment/79.htm"蛋白质的表达、分离、纯化实验蛋白质表达、分离、纯化可以：（1）探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理；（2）供作结构与功能的研究；（3）作为催化剂、营养剂等。实验方法原理携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中，在37℃，IPTG诱导下，超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白，该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子（Ni2+）固相化的层析介质加以提纯，实为金属熬合亲和层析（MCAC）。蛋白质的纯化程度可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。实验材料：HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E5%A4%A7%E8%82%A0%E6%9D%86%E8%8F%8CBL21"\t"_blank"大肠杆菌BL21试剂、试剂盒：HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=LB%E6%B6%B2%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA&t=3"\t"_blank"LB液体培养基、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E6%B0%A8%E8%8B%84%E9%9D%92%E9%9C%89%E7%B4%A0&t=3"\t"_blank"氨苄青霉素、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=Washing+Buffer&t=3"\t"_blank"WashingBufferHYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=Elution+Buffer&t=3"\t"_blank"ElutionBufferHYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=IPTG&t=3"\t"_blank"IPTG、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E8%92%B8%E9%A6%8F%E6%B0%B4&t=3"\t"_blank"蒸馏水、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E8%83%B0%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%83%A8&t=3"\t"_blank"胰蛋白胨、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E9%85%B5%E6%AF%8D%E7%B2%89&t=3"\t"_blank"酵母粉、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E6%B0%AF%E5%8C%96%E9%92%A0&t=3"\t"_blank"氯化钠仪器、耗材：HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E6%91%87%E5%BA%8A&t=1"\t"_blank"摇床、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E7%A6%BB%E5%BF%83%E6%9C%BA&t=1"\t"_blank"离心机、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E5%B1%82%E6%9E%90%E6%9F%B1&t=1"\t"_blank"层析柱、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E7%A6%BB%E5%BF%83%E7%AE%A1&t=1"\t"_blank"离心管、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E7%A7%BB%E6%B6%B2%E6%9E%AA&t=1"\t"_blank"移液枪、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E6%9E%AA%E5%A4%B4%E7%9B%92&t=1"\t"_blank"枪头盒、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E7%83%A7%E6%9D%AF&t=1"\t"_blank"烧杯、HYPERLINK"http://www.biomart.cn/product/s?wd=%E7%8E%BB%E7%92%83%E6%A3%9